Подготовьте все необходимое для определения группы крови

Методы как определить группы крови (стандартными сыворотками, цоликлонами)

Подготовьте все необходимое для определения группы крови

В современной медицине группа крови характеризует набор расположенных на поверхности эритроцитов антигенов, которые определяют их специфичность.

Существует огромное количество таких антигенов (обычно применяется таблица групп крови с разнообразными антигенами), но повсеместно производится определение группы крови с использованием классификации по резус-фактору и системе АВ0.

Определение группы является обязательной процедурой при подготовке к любой операции.

Такой анализ также необходим при поступлении на службу в некоторые контингенты, среди которых военные, работники внутренних органов и силовых структур.

Данное мероприятие проводится из-за повышенного риска возникновения состояния, угрожающего жизни человека, в целях сокращения времени, требуемого для оказания помощи в виде переливания крови.

Состав крови различных групп крови

Суть системы АВ0 состоит в наличии структур антигенов на эритроцитах. В плазме нет соответствующих им типовых антител (гамма-глобулинов). Поэтому для исследования крови можно использовать реакцию «антиген + антитело».

Эритроциты склеиваются в момент встречи антигена и антитела. Подобная реакция носит название гемагглютинации. Реакция отображается в виде небольших хлопьев при проведении анализа. Исследование основано на получении изображения агглютинации с сыворотками.

Связываются антигены эритроцитов «А» с антителами «ά», а также «В» с «β» соответственно.

Выделяются следующие группы крови по составу:

  • I (0) – ά, β — поверхность эритроцитов совсем не содержит антигенов,
  • II (А) – β — на поверхности имеется антиген А и антитело β,
  • III (В) – ά — поверхность содержит В с антителом типа ά,
  • IV (АВ) – 00 — поверхность содержит оба антигена, однако не имеет антител.

Определение групп крови

Антигены есть у зародыша уже в состоянии эмбриона, а агглютинины (антитела) появляются на первом месяце жизни.

Стандартный метод

Существует множество техник, однако в лаборатории обычно используют определение с помощью стандартных сывороток.

Метод по стандартным сывороткам используется для определения типов антигенов АВ0. Состав стандартной изогемагглютинирующей сыворотки содержит набор антител к молекулам эритроцитов. В случае наличия антигена, который подвержен действию антител, формируется комплекс антиген-антитело, что запускает каскад реакций иммунитета.

Результатом данной реакции является агглютинация эритроцитов, на основании характера происходящей агглютинации можно определить принадлежность образца к какой-либо группе.

Для приготовления стандартной сыворотки используется донорская кровь и определенная система — посредством выделения плазмы, включающей антитела, и последующего ее разведения. Разведение выполняется с использованием изотонического раствора натрий хлорида.

Разведение производится так:

  • В пробирку, содержащую 1 миллилитр 0.9 %-го раствора пищевой соли, необходимо добавить 1 миллилитр плазмы. Раствор тщательно перемешать.
  • Затем пипеткой отбирают полученный раствор плазмы в объеме 1 миллилитр. Добавляют его в пробирку, которая содержит изотонический раствор. Так необходимо достигнуть разведения плазмы с соотношением 1 к 256. Применение других разведений несет риск возникновения диагностической ошибки.

Непосредственно исследование проводится таким образом:

  • На специальный планшет помещают по капле каждой сыворотки (общим объемом примерно 0.1 миллилитр) на участок, где имеется соответствующая пометка (применяются 2 образца, из них один – контрольный, второй предназначен для исследования).
  • Затем рядом с каждой каплей сыворотки размещают исследуемый образец в объеме 0.01 миллилитра, после чего его по отдельности смешивают с каждым диагностикумом.

Правила расшифровки результатов

Спустя пять минут можно производить оценку результатов исследования. В больших каплях сыворотки происходит просветление, в одних наблюдается реакция агглютинации (образуются мелкие хлопья), в других – нет.

: Определение группы крови и резус-фактора

Здесь возможны варианты:

  • Если реакции агглютинации нет в обеих пробах с сыворотками II и III (+ контрольные 1 и IV) — определение первой группы,
  • Если свертывание наблюдается во всех пробах, кроме II — определение второй,
  • При отсутствии реакции агглютинации только в пробе с III группы — определение III,
  • Если свертываемость наблюдается во всех пробах, в том числе в IV-контрольной — определение IV.

Когда сыворотки располагаются в правильном порядке и на тарелке стоят подписи, ориентироваться легко: группа соответствует местам с отсутствующей агглютинацией.

В некоторых случаях склеивание неясно различимо. Тогда анализ необходимо переделать, мелкую агглютинацию наблюдают под микроскопом.

Метод перекрестной реакции

Суть этой техники состоит в определении агглютиногенов при помощи стандартных сывороток или цоликлонов с параллельным определением агглютининов с помощью эталонных эритроцитов.

Техника анализа перекрестным методом практически не имеет отличий от исследования с помощью сывороток, но присутствуют некоторые дополнения.

На планшетку под сыворотками необходимо добавить по капле стандартных эритроцитов. Затем из пробирки с кровью пациента, прошедшую через центрифугу, пипеткой извлекают плазму, которую помещают к стандартным эритроцитам, находящиеся на дне – добавляют в стандартную сыворотку.

Так же, как и согласно технике стандартной методики, результаты исследования оценивают спустя несколько минут после начала реакции. В случае наличия реакции агглютинации можно говорить о наличии агглютининов АВ0, в случае реакции плазмы можно судить об агглютиногенах.

Результаты исследования крови с применением стандартных эритроцитов и сывороток:

Наличие агглютинации при реакции со стандартными изогемагглютинирующими сывороткамиНаличие агглютинации при реакции со стандартными эритроцитамиГруппы крови
0(I)A(II)B(III)AB(IV)0(I)A(II)B(III)
++0(I)
+++A(II)
+++B(III)
+++AB(IV)

+ агглютинация,

– агглютинация отсутствует,

реакцию не проводят.

Перекрестный метод получил распространение за счет того, что он предотвращает диагностические ошибки, возникающие при применении стандартных методик.

Определение группы крови цоликлонами

Цоликлоны — синтетические заменители сывороток, которые содержат в своем составе искусственные заменители агглютининов типов ά и β. Они называются эритротестами «Цоликлон анти-А» (имеют розовый цвет), а также «анти-В» (имеют синий цвет). Ожидаемая агглютинация наблюдается между агглютининами цоликлонов и эритроцитами крови.

Цоликлоны

Данная методика не требует двух серий, она является более надежной и точной. Проведение исследования и оценка его результатов происходят так же, как и в стандартном методе.

Вид цоликлоновГруппа крови
Результат агглютинацииАнти-ААнти-В
0(I)
+A(II)
+B(III)
++AB(IV)

IV группа (АВ) обязательно подтверждается агглютинацией с цоликлоном «анти-АВ», а также отсутствием склеивания эритроцитов в изотоническом растворе натрия хлорида.

Экспресс-методика с помощью набора «Эритротест-группокарт»

Хотя общепринятые способы определения принадлежности крови к конкретной группе распространены повсеместно, в современной медицине происходит внедрение экспресс-методов, самым распространенным из которых является “Эритротест”.

При определении группы с применением методики “Эритротест группокарт” необходим комплект инструментов, включающий следующие приборы:

  • Планшетка, имеющая с пять лунок, для произведения определения группы по ее резус-принадлежности и системе АВ0,
  • Скарификатор, предназначенный для получения образца, необходимого для исследования,
  • Стеклянные палочки для перемешивания образцов,
  • Чистая пипетка для набора растворов.

Все перечисленные инструменты необходимо для безошибочного проведения диагностики.

Набор для анализа крови “Эритротест-группокарт” позволяет проводить исследование резус-фактора и определение группы крови в любых условиях, она особенно эффективна при отсутствии возможности использования общепринятых методов.

В лунках на планшетке расположены цоликлоны к антигенам (это цоликлоны анти-А, -В, -АВ) и к основному антигену, который обуславливает наследование резус-фактора (это цоликлон анти-D). Пятая лунка содержит контрольный реагент, который позволяет предотвратить возможные ошибки и грамотно определить принадлежность к группе крови.

: Определения групп крови с помощью цоликлонов

Загрузка…

Источник: https://KardioBit.ru/krov/metody-opredeleniya-gruppy-krovi

Подготовьте все необходимое для определения группы крови цоликлонами

Подготовьте все необходимое для определения группы крови

Показания:необходимость переливания крови, подготовка к оперативному вмешательств.

Приготовить:стандартную тарелочку с углублениями;набор стеклянных палочек;изотонический раствор хлорида натрия;набор гемагглютинирующих сывороток 1,2,3,4 групп двух серий;пипетки;исследуемую взятую из вены или пальца кровь; часы; лотки;перчатки; емкости для отработанного материала; контейнеры с дезинфицирующими растворами.

Подготовка к манипуляции:

  1. Медицинская сестра полностью подготовлена к выполнению манипуляции: одета в костюм (халат), маску, перчатки, колпак, сменную обувь.
  2. Проверить качество стандартных гемагглютинирующих сывороток по: цветовой маркировке, внешнему виду (светлая, прозрачная); сохранность упаковки, наличию правильно оформленной этикетки.
  3. Подготовить все необходимое для выполнения манипуляции.

Выполнение манипуляции:

на белую тарелочку, согласно обозначению, последовательно нанести по одной капле сыворотки 1, 2, 3 групп двух серий. Каждую пипетку немедленно опускать в ту же ампулу (флакон) из которых они были взяты;

с помощью стеклянной палочки нанести рядом с углублениями (6 углублений) по капле исследуемой крови. Капля крови должна быть в 10 раз меньше капли сыворотки;

отметить время и чистой, сухой стеклянной палочкой перемешать кровь с сывороткой 1 гр., затем другой палочкой 2 гр. и т.д. во всех углублениях;

по мере наступления агглютинации, но не ранее 3 минуты, в те капли, в которых наступила реакция агглютинации добавить по одной капле изотонического раствора хлорида натрия для исключения ложной агглютинации и продолжать наблюдение в течение 5 минут.

Оценка результатов:

а) при положительной реакции в смеси появляются видимые глазом мельчайшие зернышки, состоящие из склеившихся эритроцитов. Мелкие зерна сливаются в крупные зерна, а иногда в хлопья, сыворотка при этом – обесцвечивается;

б) при отрицательной реакции жидкость остается равномерно окрашенной в розовый цвет;

в) возможны 4 комбинации положительной и отрицательной реакции:

1. если агглютинации нет ни в одной из ячеек, то кровь I (0) группы.

2. если агглютинация в первой и третей ячейках, то кровь II (А) группы.

3. если агглютинация в первой и второй группах, то кровь III (В) группы.

4. если агглютинация в первой, второй, третей ячейках, то кровь IV (АВ) группы.

Для исключения ошибки проверяют кровь с сывороткой 4 группы, где агглютинации не должно быть.

Окончание манипуляции:

  1. Снять перчатки, поместить их в дезинфицирующий раствор.
  2. Вымыть руки, осушить полотенцем.

Примечание: определение группы крови производится в помещении с хорошим освещением при температуре 15 – 25 0С.

Определение резус-фактора со стандартной сывороткой анти-резус.

1Вступительное слово: Мы проводим определение группы крови со стандартной сывороткой анти-резус в процедурном кабинете по назначению врача. На мне шапочка, очки, маска, халат, фартук, перчатки. Руки предварительно обработаны гигиеническим способом.

Стандартная сыворотка анти-резус

Исследуемая кровь ( в пробирке)

Физиологический раствор ( в пробирке)

Ёмкость с 3% раствором хлорамина

Внести пипеткой в пробирку две капли сыворотки анти-резус

Внести отдельной пипеткой одну каплю крови

Вращать между ладонями 5 мин

Внести 1 каплю физраствора в случае если наблюдается агглютинация.

Встряхнуть пробирку, наблюдать агглютинацию 5 мин.

Форма ответа: при определении резус фактора со стандартной сывороткой анти-резус..

Агглютинация не наблюдается – резус фактор отрицательный

Агглютинация наблюдается – резус фактор положительный

После проведения манипуляции все использованные предметы замачиваются в емкости с трехпроцентным раствором хлорамина.

Не использование средств защиты медработника.

Нарушение пропорции сыворотки и крови 2:1

Не соответствие картины агглютинации заключению о резус пренадлежности.

Не продезинфицированы предметы контактировавшие с кровью

Время ожидания агглютинации менее 5 мин.

Не внесен физраствор в случае наблюдаемой агглютинации.

Выполнение манипуляции «на весу».

Сдал – отсутствие грубых ошибок, наличие не более двух не грубых ошибок.

Не сдал – наличие грубых ошибок, наличие более двух не грубых ошибок.

При совершении грубой ошибки преподаватель может попросить повторить соответствующий этап манипуляции. Если ошибка повторяется – не сдал. Допускается не более одного повторения.

Показания: необходимость переливания крови, подготовка к оперативному вмешательств.

Приготовить:флакон с антирезусной сывороткой, пипетки;пробирки;изотонический раствор хлорида натрия;исследуемую взятую из вены или пальца кровь, часы; лотки;перчатки; емкости для отработанного материала; контейнеры с дезинфицирующими растворами.

Подготовка к манипуляции:

  1. Медицинская сестра полностью подготовлена к выполнению манипуляции: одета в костюм (халат), маску, перчатки, колпак, сменную обувь.
  2. Подготовить все необходимое для выполнения манипуляции.

Выполнение манипуляции:

на дно пробирки поместить каплю антирезусной сыворотки;

сюда же поместить каплю исследуемой крови;

пробирку перевернуть и качательными движениями смешать кровь с сывороткой так, чтобы содержимое растекалось по стенкам. Это ускорит реакцию агглютинации;

при наличии агглютинации через 3 минуты для исключения ложной агглютинации добавить 3 мл изотонического раствора хлорида натрия и перемешать путем двукратного перевертывания пробирки. Не взбалтывать!

Оценка результата:

а) при наличии агглютинации – кровь резус-положительная;

б) при отсутствии агглютинации – кровь резус-отрицательная.

Окончание манипуляции:

  1. Снять перчатки, поместить их в дезинфицирующий раствор.
  2. Вымыть руки, осушить полотенцем.

34. Оказание помощи врачу при наложении лейкопластырного скелетного вытяжения и вытяжения с помощью петли Глиссона

Уложить пациента на горизонтальную поверхность кровати с системой блоков и грузом в изголовье

Закрепить петлю Глиссона на голове либо из лейкопластыря сформировать петлю в основании черепа так, чтобы она фиксировалась у основания черепа (под подбородком и под большими затылочными буграми)

Прикрепить груз весом 6 кг (вес груза зависит от вида повреждения и определяется врачом)

Накладывать утром для предупреждения кровенаполнения и растяжения вен

Придать ноге возвышенное положение под углом 45 град.

Первые туры сделать у основания пальцев

Далее по спирали бинтовать до паховой складки

Туры должны оказывать умеренное давление на мягкие ткани; не должны вызывать неприятные ощущения; пальцы на стопе должны быть розовыми

36. Применение съемного бандажа, корсета

Предназначением бандажа, корсета является фиксация части туловища в функциональном состоянии, предупреждение осложнений, связанных с анатомическими дефектами тела, приводящими в отсутствии бандажа или корсета к более грубым анатомическим и функциональным расстройствам

Бандаж (корсет) должен содержаться в чистоте

Пациент должен принять горизонтальное положение перед надеванием бандажа (корсета)

При надевании не защемлять кожу; не допускать болезненных ощущений

Пуговицы и петли должны располагаться на лицевой стороне бандажа; лямки не должны «впиваться» в мягкие ткани.

Пребывание в бандаже (корсете) не должно приводить к нарушениям дыхания и сердечной деятельности

37. Выявление признаков непригодности крови к переливанию, транспортирование крови из отделения переливания крови

Непригодная кровь к переливанию, если:

— нарушены сроки и условия хранения крови

— флакон с кровью не имеет герметичности

— верхний слой во флаконе с кровью розовый (гемолиз эритроцитов)

— имеются капли жира, пленки, сгустки

— нечеткая граница между слоями крови во флаконе

Хранится кровь в холодильнике при температуре 4 град; транспортировка в специальных контейнерах, нивелирующих изменяющийся температурный режим окружающей среды

Определение группы крови с помощью цоликлонов анти-А и анти-В

Приготовить тарелку, цоликлоны, стеклянные палочки, часы, исследуемую кровь

Разделить тарелку полосой фломастера на 2 части

Нанести на тарелку по одной капле цоликлона анти-А и анти-В

Нанести на тарелку по одной капле крови (рядом с каплей цоликлона), каждая из которых в 10 раз меньше капли цоликлона

Разными концами стеклянных палочек перемешать

Покачивать в течение 2,5 минут

Читать результаты реакции:

агглютинации нет – 1 группа крови

агглютинация в анти-А — 2 группа крови

агглютинация в анти-В — 3 группа крови

агглютинация в обеих каплях – 4 группа крови

Приготовить пробирки, пипетки, физраствор (раствор хлорида натрия 0,9 %), универсальный реагент-антирезус, исследуемую кровь

Нанести на стенку пробирки каплю универсального реагента-антирезуса и каплю крови, равных по размеру

Добавить 3 мл. физраствора

Перевернуть, не встряхивая

Читать результаты реакции:

Наличие агглютинации – исследуемая кровь резус-положительная

Отсутствие агглютинации – исследуемая кровь резус-отрицательная

По материалам zna4enie.ru

Информация о характеристиках крови (группа и резус-фактор) приобретает основополагающее значение в случаях, когда речь заходит о жизни и смерти человека.

Подобный анализ в обязательном порядке проводится перед оперативными вмешательствами, родоразрешением и в других ситуациях, которые способны повлечь за собой необходимость немедленной процедуры переливания крови.

Существуют разные способы и методики проведения исследования, и одна из них основывается на использовании веществ, которые называются цоликлонами. Как происходит определение группы крови с помощью цоликлонов, и какие особенности имеет процедура?

Цоликлоны представляют собой специальные антитела, которые синтезируют из крови лабораторных мышей посредством генно-инженерных технологий.

Суть методики определения группы крови с помощью цоликлонов состоит в их способности вступать в реакцию с агглютиногенами (клетками, входящими в состав человеческой крови), результатом которой становится их склеивание, или агглютинация. У представителей каждой из групп крови имеется определенный набор агглютиногенов: у носителей первой группы (А) они отсутствуют, у обладателей второй — присутствуют клетки типа А и т.д.

Реагенты, необходимые для анализа, также подразделяются на несколько разновидностей со специфическими характеристиками. Для определения группы крови цоликлонами их смешивают с образцами крови человека, после чего оценивают реакцию и делают соответствующие выводы.

Чтобы методика определения группы крови с помощью цоликлонов была максимально информативной, важно придерживаться правил работы с веществами и выполнения процедуры:

  • анализ проводится только в условиях полноценной лаборатории в стерильных условиях при температуре от +15 до +25 градусов и при достаточно ярком освещении;
  • в работе следует использовать только вещества с неистекшим сроком годности (он составляет 2 года), которые хранились в плотно закупоренных емкостях; если раствор помутнел, содержит осадок или другие посторонние примеси, рекомендуется его заменить;
  • для проведения исследования потребуется ровная поверхность (планшетка, специальная тарелочка) белого цвета, несколько пипеток и стеклянных палочек для смешивания образцов.

Кровь для исследования может использоваться любая (из пальца, вены или замороженная) – главное, чтобы она хранилась при соответствующих условиях и была пригодной для проведения процедуры.

Процедура определения группы крови цоликлонами имеет определенный алгоритм, который представлен следующими этапами:

  1. Надеть маску и перчатки, прогреть образцы крови до 36 градусов, цоликлоны – до 20 градусов.
  2. Планшетку или тарелочку для проведения анализа разметить и написать на ней данные пациента.
  3. Под соответствующими пометками нанести по одной крупной капле растворов цоликлонов анти-А и анти-В (примерно по 0,1 мл), рядом капнуть по маленькой (около 0,01 мл) капле крови.
  4. Смешать образцы с реагентами посредством палочек, причем для каждого из них лучше использовать отдельный инструмент.
  5. Подождать 3-5 минут, аккуратно покачивая планшет, чтобы жидкости хорошо перемешались. Более 10 минут ждать не рекомендуется, так как образцы начнут подсыхать, вследствие чего результаты могут исказиться.

Источник: https://mbmedicall.com/o-krovi/podgotovte-vse-neobhodimoe-dlya-opredeleniya-gruppy-krovi-tsoliklonami/

Поделиться:
Нет комментариев

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.