Определение количества гемоглобина

Содержание

Методы определения гемоглобина в крови: подробно о каждом

Определение количества гемоглобина

Гемоглобин (Hb) – молекула, с помощью которой переносится кислород. Она расположена внутри зрелых эритроцитов, лишенных ядер. Клетки получают кислород из альвеол легких, переносят его органам к клеткам-мишеням.

От них получают углекислый газ, и переносят его обратно в легочную систему. Без этого действия невозможна жизнь человека. Существуют различные состояния, при которых гемоглобин может повышаться или снижаться.

Для диагностики используют различные лабораторные методы определения функции соединения гемоглобина. Их подбирает врач индивидуально для каждого пациента.

У взрослого человека норма концентрации Hb зависит от пола:

  • женщины 11-14г/% или 110-140 г/л;
  • мужчины 12-16 г/% или 120-160 г/л.

Для мужчин норма более завышена, так как они имеют большую мышечную массу, по сравнению с женщинами.

Снижение концентрации гемоглобина наблюдается при следующих состояниях и заболеваниях:

  • сниженная концентрация эритроцитов в следствии железодефицитной, серповидно-клеточной анемии;
  • недостаточное количество веществ, которые влияют на продукцию эритроцитов (фолиевая кислота, витамин B12);
  • заболевание красного костного мозга.

Повышенная концентрация Hb наблюдается при следующих состояниях и заболеваниях:

  • повышенная продукция эритроцитов при заболевании красного костного мозга, злокачественных новообразованиях;
  • компенсаторное повышение количества эритроцитов вследствие сердечно-сосудистых и легочных заболеваний;
  • снижение количества плазмы крови вследствие чего число форменных элементов повышается в 1 л биологической жидкости.

Гемоглобин появляется в эритроцитах после утраты ядра и приобретении зрелости клетки. Местом утилизации красных кровяных клеток и Hb является селезенка. Жизненный цикл 1 клетки совместно составляет 120 дней. После гибели в кровь выделяется железо, которое поставляется в красный костный мозг. С помощью этого элемента продуцируются новые красные кровяные тельца.

Методы измерения гемоглобина в крови

Существуют следующие методы анализа гемоглобина в биологической жидкости:

  • гемиглобинцианидный;
  • гемихромный;
  • Сали;
  • аммиачный;

После использования соответствующей методики чаще всего применяют полуавтоматический анализатор, который измеряет спектр длины волны молекулы Hb.

Подсчет показателей осуществляется не только в крови, но и в моче, так как в мочевыделительной системе возможны небольшие или значительные кровотечения.

Полуавтоматический гематологический анализатор полностью исключают реставрации врачебные ошибки в отчете необходимого значения. Но прибор не сможет увидеть и распознать нарушение различных параметров.

Ручной подсчет основывается на применении реактива и биологической жидкости. Метод не подсчитывает число клеток, а определяется их присутствие или отсутствие. Подходит для мочи

Унифицированные методы определения гемоглобина

Унифицированная методика – способы измерения показателей, применяемые в большинстве лаборатории. Являются точными, быстрыми, практичными. Для Hb это гемицианидный метод с фотоколориметрическим подсчетом. Позволяет выявить точное количество показателя с помощью подсчета длины волны на специализированном полуавтоматическом приборе.

Второй унифицированной методикой является гимехромный способ. Его принцип тот же, но используются более качественные реактивы, которые не приносят вреда здоровью врачей.

Гемиглобинцианидный метод определения гемоглобина в крови

У гемоглобина имеется множество форм, поэтому рассчитать длину его волны очень сложно. Для упрощения подсчета применяют специализированные химические вещества, которые переводит его в метгемоглобин.

Для получения точных результатов необходимо использовать трансформирующий раствор, специализированные измерительные пробирки, фотоэлектроколориметр. Hb имеет длину волны 540 м. Именно в таком пределе прибор подсчитывает заданный показатель.

Полученные данные подставляют в формулу, которая переводит общее количество показатели в граммы на литры (г/л).

Важно! На данный момент метод определения концентрации гемоглобина в крови используется редко, так как применяемые реактивы опасны для жизни и здоровья в врачей-лаборантов. При нарушении правил приготовления могут возникнуть ожоги кожных покровов и слизистых оболочек.

Читай подробно о гемиглобинцианидном методе в отдельной статье!

Гемихромный метод определения гемоглобина в крови

С помощью методики Hb переводится в циангемоглобин с помощью реактивов, которые полностью безопасны для человека. Для этого используют цианистые соединения (натрий додецилсульфат, лаурилсульфат).

Образуется гемихром, который подсчитывается при длине волны 540 нм. Полученные данные подставляют в формулу для перевода показателя в г/л.

Подробная статья о гемихромном методе определения гемоглобина.

Цианидный метод исследования гемоглобина в крови

Для проведения анализа используют капиллярную и венозную кровь. В биологическую жидкость человека добавляют трансформирующий раствор. С помощью него происходит преобразование всех форм Hb в метгемоглобин.

В пробирку наливают 5 мл реагента и 20 мкл биологической жидкости. Выжидают 10 минут, пока произойдет реакция. Полученную жидкость заливают в специальную кювету, фотоэлектроколориметр пропускает через нее лучи, подсчитывает элементы в области длины волны, равной 543 нм. Hb рассчитывается по формуле с помощью полученных показателей.

Метод Сали для определения гемоглобина в крови

Определение количества гемоглобина по методу Сали редко применяется в клинических учреждениях, так как существуют более совершенные способы.

Получают биологическую жидкость человека, в которую добавляют хлористоводородная кислоту. Раствор тщательно перемешивают. Это позволяет Hb перейти в другую форму – солянокислый гематин. Добавляют дистиллированную воду до тех пор, пока окрашивание не будет идентичным с контрольной пробиркой (коричневый цвет).

На нижнем мениске пробирки будет стоять цифра, которая указывает на содержание показателя в 100 г крови. Для вычисления концентрации в 1 литре, показатели умножают на 10. Процентное содержание Hb вычисляется с помощью пропорции:

16,7%=100

  • А%=Х
  • Х=А×100/16,7
  • Х – определяемый показатель,
  • А – полученное число гемоглобина с помощью гемометра,
  • 16,7 – процентное количество гемоглобина в контрольной пробе.

Метод спектрального анализа для измерения гемоглобина

Наиболее точным методом определения гемоглобина является использование спектрофотометра. Он определяет только 1 из форм гемоглобина, улавливая длину его волны. В крови человека существуют различные формы Hb:

  • Оксигемоглобин;
  • Дезоксигемоглобин;
  • Карбоксигемоглобин;
  • Метгемоглобин.

Для исследования с помощью спектрофотометра необходим перевод показателей только в 1 из форм. Для этого применяют различные реактивы. Показатель окрашивается определенным цветом (красный, зеленый). Его длину волны улавливает прибор, подсчитывает все элементы в заданной траектории.

Аммиачный метод определения гемоглобина

Аммиачный метод количественного определения гемоглобина соответствует предыдущим способам. Разницу составляет использование аммиака в концентрации 0,04%.

Проба должна настояться, чтобы произошла реакция перехода всех форм Hb в одну. Ее рассчитывают с помощью полуавтоматического анализатора в виде спектрофотометра. Раствор помещают в кювету, устанавливают в прибор.

Рассчитывают показатель на длине волны 543 нанометров.

Методы определения гемоглобина в моче

Существует 4 разновидности исследования мочи. Каждая из них отличается применяемыми реактивами. Для исследования собирают только свежую порцию урины. Если она настоится, Hb превратиться в медгемоглобин, Поэтому реакция будет невозможна. Урину подготавливают. Для этого к ней добавляет 2 мл уксусной кислоты и 5 мл диэтилового эфира.

  • Реакция с гваяковой кислотой. Разводят щепотку кислоты, добавляют 3 мл этанола 96%. Добавляют 8-10 капель получившейся жидкости к 8-10 каплям разведенной урины. Если Hb присутствует в образце, он окрашивается в синий цвет.
  • Реакция с амидопирином. К 2-3 мл разведенной урины добавляют 10 капель раствора амидопирина и 10 капель 3% перекиси водорода. Если Hb присутствует, урина окрашивается в фиолетовый цвет.
  • Реакция с бензидином. В пробирку добавляют 6 капель бензидина, 6 капель 3% перекиси водорода,4 капли чистой урины. Если Hb присутствует, получившаяся жидкость окрашивается в зеленый цвет.
  • Использование тест-полосок, таблеток. Они содержат специализированные реактивы в готовом виде. Полоски опускают в мочу, достают, оценивают цветовую шкалу. Таблетки полностью растворяют в биологической жидкости человека. Индикаторная шкала подписана на упаковке.

Какой метод определения гемоглобина наиболее точный?

Наиболее точным методом определения показателя считается фотоколориметрический с использованием гемихромного разведения. С помощью него снижается риск врачебной ошибки. Прибор автоматически подсчитывает показатель. Здесь важно правильно подготовить приборы, пробирки, кюветы, настроить аппарат. Методика безопасна для лаборанта.

В определении Hb в моче наиболее информативным является использование тест-полосок. Здесь полностью исключается риск неправильного разведения реактивов. 

Определение гемоглобина является важным информативным тестом. Можно определить кровотечение в мочевыводящих путях, состояние сердечно-сосудистой и легочной системы.

С помощью методов вовремя выявляются различные виды анемии при низких концентрациях гемоглобина. После получения данных рекомендуется обратиться к лечащему врачу.

Он расшифрует полученный результат, выявит нормы и отклонения, назначит лечение. 

Узнай о методах определения гликозилированного гемоглобина в крови!

Екатерина Беликова, врач лабораторной диагностики, специально для Mirmam.pro

Источник: https://mirmam.pro/metody-opredeleniya-gemoglobina-v-krovi

Вся суть гемоглобина

Определение количества гемоглобина

Одно из самых часто используемых исследований крови человека – анализ на гемоглобин. Медработники проводят этот анализ для осуществления контроля за здоровьем больных, а также для определения множества болезней. Наиболее частым является определение уровня гемоглобина в крови при её общем анализе.

Красные кровяные тельца являются основным составляющим элементом клеток крови. Гемоглобин, как известно, содержится в красных кровяных тельцах, представляет собой уникальный белок. По сути это пигмент красного цвета, содержащий атомы железа. В результате соединения кислорода, поступающего в кровь, с молекулами гемоглобина, кровь и обретает красный цвет.

Общеизвестно, что этот белок очень важен для жизнедеятельности организма человека. Ведь его способность образовывать непрочные соединения с кислородом сложно переоценить. Благодаря ей, гемоглобин отвечает за беспрерывное перенесение кислорода к каждому органу и системе человеческого организма.

При прохождении воздуха через лёгкие, молекулы кислорода отсоединяются и создают нестойкую связь с ферментом. Далее, при перемещении крови по организму этот белок осуществляет разнесение кислорода по всему организму, к каждой его клетке.

После доставки молекулы кислорода к клетке, фермент присоединяет к себе молекулу окиси углерода, которая содержится в клетках после сжигания питания. Далее, клетка осуществляет перенесение окиси углерода обратно в лёгкие, где они выводится наружу. Таким образом, процесс длится бесконечно. Как видим, это вещество выполняет дыхательную функцию организма.

Основные формы гемоглобина

Чистый белок ещё именуется основным. Когда к белку (глобину) присоединяется глюкоза, получается гликированный (гликолизированный гемоглобин). Он возрастает в случаях пресыщения крови глюкозой. Такие состояния характерны для сахарного диабета.

Потому Всемирная организация здравоохранения рекомендовала анализ на гликированный гемоглобин как самый достоверный метод определения сахарного диабета. Те, кто страдает данным недугом, должны сдавать подобный анализ раз в квартал, а возможно и чаще.

Существует ещё одна форма, которую имеет данный фермент, — фетальный гемоглобин. Он имеет иные свойства в виду несколько другого строения. Фетальный гемоглобин – это фермент, характерный для новорождённых.

В крови малышей среднее содержание гемоглобина этой формы достигает 80%. По достижении первого года жизни этот белок разрушается. Происходит его почти полная замена взрослой формой белкового соединения.

Если же у взрослых обнаруживается фетальный гемоглобин, то это является признаком нарушений и болезней.

Нормы содержания гемоглобина

Как уже упоминалось выше, определение содержания этого белка в составе крови является одним из самых важных и распространённых анализов. Такое исследование необходимо сдавать натощак. Ответ с анализом готов практически сразу. Среднее содержание гемоглобина на протяжении суток немного изменяется.

У мужчин среднее содержание гемоглобина составляет около 135–160 грамм на литр крови. У женщин же эти показатели варьируются в пределах 120–140 грамм на литр.

Если говорить о гликированном гемоглобине, то в норме его содержание лежит в пределах 4–5%. Это значит, что по сравнению с уровнем свободного гемоглобина, гликированный составляет до 5%. Наибольшее значение содержания гемоглобина наблюдается с утра.

После еды же на протяжении пары-тройки часов его показатели падают до минимума. Особенно это заметно после приёма жидкой еды. Необходимо отметить, что белок у взрослых людей находится в большей концентрации, нежели у детей.

Кроме того, у мужчин, гемоглобин в крови находится в большей концентрации, нежели у женщин, что подтверждают вышеприведённые цифры. Также фермент несколько зависит от возраста человека.

Необходимо отметить, что гликированный гемоглобин может и не иметь прямой зависимости от того, какое содержание в крови демонстрирует прямой белок.

Отметим, что проверяют показатели этого белка путём использования специального набора реагентов (обязательно натощак). Такое средство именуется Гемоглобин Агат.

Определение содержания фетального гемоглобина в крови взрослых пациентов (также делается натощак) даёт возможность диагностировать заболевания крови. Кроме того, гемоглобин повышается при онкологии. Потому увеличение его концентрации выше 1% может дать ответ об онкологической патологии.

Заболевания, сопровождающиеся повышением гемоглобина

В повышенной концентрации фермент может указывать на определённые заболевания:

  • Сгущение крови.
  • Непроходимость кишечника.
  • Возрастание числа эритроцитов в крови – эритроцитоз.
  • Ожоги.
  • Врождённый порок сердца.
  • Сердечно-лёгочная недостаточность.

Если наблюдается повышенный гликолизированный белок, то это может сигнализировать о наличии дефицита железа, а также сахарного диабета.

Стоит отметить, что возрастание уровня гемоглобина является следствием физических нагрузок на организм. У пилотов и альпинистов гемоглобин повышается после нахождения на высоте. Также высокий уровень белка – это норма для людей, живущих в высокогорье. Более высокое содержание гемоглобина вполне может возникать даже после обычной прогулки на свежем воздухе.

Анемия, её причины и следствия

Состояние, когда в крови падает гемоглобин, именуется анемией. Она является следствием болезней крови с разрушением эритроцитов, сильных кровотечений. Также низкий уровень фермента демонстрируется в результате переливаний крови.

Влияет на него и алкоголь. Уровень гемоглобина стремительно падает и от недостатка железа, витаминов В12, а также фолиевой кислоты. Они способствуют синтезу гемоглобина.

Также это нарушение нормы является следствием хронических болезней, таких как талассемия.

Гликированный гемоглобин понижается при гемолитической анемии, гипогликемии, переливаниях крови, а также кровотечениях.

Будущим мамам на заметку

У беременных также очень часто снижается уровень этого белка. Это является свидетельством нехватки железа у беременной. Ведь потребность в этом микроэлементе при вынашивании ребёнка возрастает.

Медицина рекомендует беременным следить за данным показателем. Ответ на вопрос о снижении фермента у беременных кроется в том, что обычному человеку для жизнедеятельности нужно до 10–15 мг железа в сутки, а беременной – до 18 мг.

Пониженный гемоглобин способен вызвать досрочные роды либо задержку развития ребёнка.

Продукты, способствующие повышению гемоглобина

  • Зелень: репчатый лук, молодая ботва репы, горчица, листья обычного одуванчика, кресс-салат, петрушка, шпинат.
  • Овощи: тыква, свёкла, молодая печёная картошка, помидоры.
  • Крупы и каша: гречневая, чечевица, фасоль, рожь, толокно, горох.
  • Мясо: говядина, сердце, почки, печень, язык, белое мясо курицы.
  • Ягоды: клюква и чёрная смородина в свежем либо замороженном виде.
  • Соки: морковный, свекольный, гранатовый, некоторые виды яблочного сока.
  • Других продукты: чёрная или красная икра, грецкие орехи, яичный желток, морепродукты, чёрный шоколад, алкоголь в виде красного вина, гематоген, сушёные грибы, сухофрукты.

Необходимо отметить, что железо хорошо усваивается только при определённых условиях. Для более эффективного усваивания нужно употреблять пищу, которая богата витамином С. Так, овощной либо фруктовый сок положительно влияет на усваивание железа. Чай или кофе наоборот замедляет усвоение железа организмом.

Чем же их заменить? Ответ — зелёным чаем либо соками.

При беременности не следует есть печень для поднятия уровня гемоглобина. Ведь в ней в высоких концентрациях присутствуют витамины А и D. А каждый из них при избыточном употреблении негативно влияет на организм.

Гранатовый сок является чрезвычайно эффективным средством увеличения содержания фермента. Однако у него есть побочное действие – вероятность возникновения запоров.

В любом случае необходимо ограничить алкоголь.

Рецепты средств для повышения гемоглобина

Существует множество рецептов, содержащих доступные вещества, повышающие содержание этого белка. Все их следует принимать системно, чтобы обеспечивать поддержку организма. Не забудьте только о чувстве меры и помните, что превышение разумного количества пусть даже и полезной пищи вместо благотворного эффекта приведёт только к расстройству желудочно-кишечного тракта. Итак:

  • Перемолоть по стакану гречневой крупы и грецких орехов, в смесь добавить стакан мёда и тщательно перемешать. Ежедневно есть по столовой ложке, желательно натощак.
  • Перемолоть и перемешать курагу, грецкие орехи, изюм и мёд в одинаковых пропорциях. Употреблять от 1 до 3 столовых ложек в сутки. Этот рецепт ещё и наполнит организм витаминами.

Источник: https://prokrov.ru/vsya-sut-gemoglobina/

Все про определение гемоглобина в крови

Определение количества гемоглобина

Методы определения гемоглобина (Hb) были впервые разработаны более ста лет назад, так что гемоглобин был одним из первых диагностических анализов крови, доступных клиницистам в первые десятилетия 20-го века, когда лабораторная медицина пребывала в зачаточной форме.

Гемоглобин состоит из четырех белковых молекул (цепей глобулина), соединенных вместе. Такие цепи содержат в себе соединение под названием гем. Включенный в его состав, он является по сути атомом железа, так необходимым для циркуляции кислорода и углекислого газа в нашем организме.

В любом случае, оценить содержание этого белка в крови необходимо для общего обследования здоровья и не только. Анализ поможет диагностировать условия, которые влияют на эритроциты. Несколько заболеваний и состояний могут влиять на них и, следовательно, уровень гемоглобина в крови.

Снижение количества Hb может привести к анемии, когда ткани и органы в организме не получают достаточного количества кислорода, вызывая усталость и слабость. Если же вырабатывается слишком много эритроцитов, выявляют полицитемию, когда кровь сгущается, вызывая вялый кровоток и связанные с этим проблемы.

Тест на уровень белка, проводят, в том числе для определения состояния пациента и контроля отклика на лечение.

Единицы измерения

Грамм(г) гемоглобина на децилитр(дц) крови, выражают уровень гемоглобина. Нормальные показатели степени Hb варьируются в зависимости от возраста и половой принадлежности человека:

  1. Новорожденные: от 17 до 22 г / дл
  2. Недельный возраст: от 15 до 20 г / дл
  3. Один месяц: от 11 до 15 г / дл
  4. Дети: от 11 до 13 г / дл
  5. Взрослые мужчины: от 14 до 18 г / дл
  6. Взрослые женщины: от 12 до 16 г / дл
  7. Мужчины старше 60: от 12,4 до 14,9 г / дл
  8. Женщины старше 60: от 11,7 до 13,8 г / дл

Между разными лабораториями эти показатели могут незначительно разниться.

Сапониновый метод

Вопреки тому, что этот способ один из самых старых, он все еще применяется. При нем проводится тест крови, нацеленный на выявление характерных телец, возникающих при наследственной форме дефицита фермента глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы. Именуется такой анализ тельцами Гейнца, применяемый для распознавания анемии. Проводится он таким образом:

Читайте так же:  Значения гемоглобина при онкологиях

На стеклянную пластинку наносится взятая у пациента капля крови. Кровь перемешивается деревянной палочкой пропитанной раствором сапонина, около одной минуты до ее полного лизирования. Пластину помещают в прибор наблюдения и сравнивают окраску пробы с окраской оптического клина, который перемещают до совпадения интенсивностей цвета.

При применении данной методики тельца Гейнца не рассасываются, в результате чего подвергается изменению спектр поглощения, и вероятность погрешности может составлять до 30%.

Метод Сали

При методе Сали гемоглобин вступает в реакцию с хлористым водородом, в результате чего образуется кислотный гематин. Его разводят до состояния сопоставимости цвета раствора с окраской блока компаратора.

Затем клиницист может определить концентрацию гемоглобина путем считывания из калибровочной трубки.

Оказать влияние на исход теста могут:

  • время реакции между Hb и хлористым водородом;
  • окрас геминхлорида, напрямую обусловленный уровнем билирубина в крови;
  • уровень освещения.

Ошибка метода Сали при анализе доходит до 30%.

Химические методы

Суть химических методов состоит в выявлении уровня гемоглобина в крови на основании цвета обычной крови с кровью, имеющей в своем составе карбоксигемоглобин(COHb), под воздействием специальных реактивов. Если в крови присутствует COHb, то после добавления реактивов она слабо изменяет свой цвет или не меняет вовсе. Нормальная же кровь заметно реагирует, меня свой окрас.

Недостаток химического метода в том, что он непригоден для выявления небольшого количества COHb в крови.

Химические методы не применяются для будничных выявлений гемоглобина, несмотря на то что рекомендуются в качестве эталонных. Они имеют достаточно высокую точность, но довольно кропотливы в работе и имеют высокую стоимость.

Для обыденных лабораторных исследований более предпочтительными являются методы, описанные выше, как наиболее простые, быстрые в проведении и малобюджетны.

Спектрофотометрические методы исследования

Принцип состоит в том, что кровь разбавляют в растворе, содержащем феррицианид калия и цианид калия. Феррицианид калия окисляет железо в геме в состояние трехвалентного железа с образованием метгемоглобина, который превращается в гемиглобинцианид (HiCN).

Читайте так же:  Как действовать, если повышен гемоглобин в эритроците

Преимущества метода:

  • легко адаптируется к автоматизированным гематологическим анализаторам;
  • хорошо разработан и тщательно исследован;
  • недорогой реагент.

Недостатки:

  • ручной метод требует точного спектрофотометра;
  • реагент (цианид) опасен;
  • вышеуказанное ограничивает его использование за пределами лаборатории;

Неинвазивные методы

Благодаря наличию новых технологий для обнаружения спектральной картины и концентрации гемоглобина стали чаще использоваться неинвазивные методы, впервые введенные для мониторинга во время операции, и в последнее время для проведения точечных проверок гемоглобина в первичной медико-санитарной помощи.

Некоторые неинвазивные устройства используют пульсоксиметрию, в то время как другие полагаются на белый свет и захватывают данные передачи для измерения концентрации гемоглобина в тканевых капиллярах.

Спектроскопия окклюзии — это неинвазивная измерительная техника с кольцевым датчиком, прикрепленным к пальцу субъекта. Датчик временно прекращает кровоток, инициируя оптический сигнал, который дает высокое отношение сигнал / шум.

Это обеспечивает измерение концентрации гемоглобина.

Анализатор гематологии

Автоматический гематологический обычно используется для обеспечения высокой пропускной способности для анализа различных красных и белых кровяных клеток, а также уровней гематокрита и гемоглобина из образца крови. Эти анализаторы предлагают более высокое значение точности за небольшую часть времени по сравнению с ручными методами.

Первоначальная стоимость автоматизированного анализатора высока, а регулярное техническое обслуживание и персонал лаборатории, необходимый для устройства, могут увеличить затраты.

Кроме того, требуются стабильные климатические условия, что делает его неприемлемым вариантом для нелабораторных сред.

Как проверить уровень гемоглобина на дому?

В настоящее время есть домашние анализаторы для определения гемоглобина в крови.

Тестирование на дому предлагает много преимуществ, но необходимо также признать потенциальные компромиссы между качеством и удобством и принять меры для защиты себя от возможности ложных результатов и вашей собственной недостаточной подготовки.

Поговорите со своим врачом об этом типе тестирования и проконсультируйтесь по поводу любых вопросов или проблем, которые могут возникнуть у вас.

Устройство, которое использует одну каплю крови, может быстро диагностировать анемию и позволить недорогой мониторинг на дому.
Одноразовое самотестирующее устройство использует химический реагент, который производит видимые изменения цвета, соответствующие разным уровням гемоглобина.

Вот некоторые из этих приборов:

EasyTouch GCHb

Производитель: Bioptik

Средняя розничная цена: 5000р.

Анализатор гемоглобина, а также холестерина и глюкозы в крови. Является наилучшим вариантом для проведения домашнего использования. В наборе к нему поставляется:

  • тест-полоски на глюкозу в количестве 10 штук;
  • полоски на холестерин в количестве 5 штук;
  • полоски на гемоглобин в количестве 2штук;
  • Автоматическая ручка-прокалыватель;
  • ланцеты в количестве 25 штук;
  • чехол для носки.

Прибор питается от двух батареек типа АА. Время теста занимает всего 6 секунд. К особенностям прибора можно отнести функцию памяти с объемом в 200 измерений. Погрешность в показаниях прибора EasyTouch равна 20% и укладывается в нормы предъявляемые к приборам данного класса.

HemoCue Hb 201+

Производитель: HemoCue AB, Швеция

Средняя розничная цена: 40000р.

HemoCue Hb201+ обеспечен встроенной автоматизированной электронной системой самоконтроля. Эта система самостоятельно проводит тест на работоспособность и правильное функционирование аппарата.

В зависимости от насыщенности крови белком гемоглобина, анализатор крови, предоставляет результаты на дисплее от нескольких секунд до минуты. В настройках вы можете сами установить в чем будут проявляться показания: г/л, г/дл или в ммол/л.

В сравнении с международным эталонным методом (метод ICSH) точность Hb201+ составляет ±1.5%.

ABBOTT I-STAT-1

Производитель: Abbott

Средняя розничная цена: 20000р.

Является универсальным аппаратом, с помощью которого можно провести многие необходимые тесты, не отходя от постели больного. Уникальность этого аппарата в одноразовых картриджах не требующих калибровки. Аппарат в состоянии измерить уровень гемоглобина, сахара, TCO2, HCO3, BE, сатурацию кислорода (SO2), анионный интервал.

Универсальный анализатор i-STAT:

  • не нуждается в калибровке;
  • питается от пары батареек типа АА;
  • определяет результат в течении двух минут;
  • имеет память на 5 000 результатов;
  • для связи с ПК имеется ИК-порт;
  • содержит встроенный портативный принтер.

Модель оригинальна тем, что не нуждается в приобретении специальных дополнительных материалов вне комплектации.

Если какой-либо из ваших уровней Hb не в норме, это не обязательно указывает на медицинскую проблему, требующую лечения.

Диета, уровень активности, лекарства, женский менструальный цикл и другие соображения могут влиять на результаты. Кроме того, у вас может быть повышен гемоглобин, если вы живете на большой высоте. Поговорите со своим врачом, чтобы узнать, что означают ваши результаты.

Источник: http://1pokrovi.ru/analizy-krovi/obshhij/gemoglobin/opredelenie.html

Методы определения гемоглобина

Определение количества гемоглобина

Маленькие колебания морфологического состава крови происходят в течение дня под влиянием приема пищи, работы и т. п. исходя из этого лучше брать кровь утром натощак либо при повторных изучениях неизменно в одно да и то же время и в однообразных условиях. При общеклиническом анализе крови определяют содержание в единице объема гемоглобина, эритроцитов.

лейкоцитов, их качественный состав, у некоторых больных и число тромбоцитов и ретикулоцитов. В один момент с общеклиническим анализом крови определяют реакцию оседания эритроцитов (см. Оседание эритроцитов). Кровь получают проколом кончика IV пальца левой руки, предварительно протертого спиртом.

Прокол создают на глубину 2,5—3 мм стерильным ланцетом либо иглой Франка со сменными стерилизованными лезвиями. Ограничиваться лишь протиранием лезвий спиртом запрещается, поскольку наряду с этим не уничтожается вирус инфекционного гепатита. Первую каплю крови стирают сухой ватой, последующие применяют.

Сперва набирают кровь в пипетку для определения гемоглобина, после этого в смесители либо пробирки для счета эритроцитов и лейкоцитов, после этого делают мазки для подсчета лейкоцитарной формулы, тромбоцитов и ретикулоцитов.
Определение гемоглобина создают разными способами в зависимости от имеющихся устройств, чаще всего гемометром (см.) ГС-3.

Кровь набирают в пипетку от прибора до метки 0,02 мл (20 мм 3 ), выдувают в градуированную пробирку, в которую предварительно налит до нижнего колечка 0,1 н. раствор соляной кислоты. и размешивают. По прошествии 5 мин. в пробирку по каплям приливают, помешивая, дистиллированную воду, пока цвет раствора не сравняется с цветом имеющегося в приборе стандарта.

Деление шкалы, на котором окажется нижний мениск жидкости, укажет на содержание гемоглобина в грамм-процентах (г%), другими словами в граммах на 100 мл крови. Прежнее выражение содержания гемоглобина в единицах (условных процентах) выходит из потребления.

Дабы перевести содержание гемоглобина, выраженное в единицах, в грамм-проценты, направляться не забывать, что 100 единиц соответствуют 16,67 2%, 1з%=6 единицам. Норма гемоглобина для дам 11,7— 15,8 г% (70—95 ед.), для мужчин 13,3-18 г% (80—108 ед.). При применении фотоэлектрического эритрогемометра смешивают 5 мл 0,1% раствора карбоната натрия и 40 мм 3 крови.

(2 пипетки от гемометра ГС-3). Смесь наливают в кювету с отметкой Г и поступают потом в соответствии с приложенным к прибору указаниям. Более правильным есть определение гемоглобина на электрофотоколориметре ФЭК-М. В пробирку, содержащую точно отмеренные 4 мл 0,04% раствора аммиака, прибавляют 20 мм 3 крови (1 пипетку от гемометра ГС-3).

Для получения 0,04% раствора аммиака берут 1,6 мл 25% раствора аммиака с удельным весом 0,91 и разбавляют водой до 1 л. Определение на ФЭК-М ведут при зеленом светофильтре в кювете шириной 10 мм, отсчет по красной шкале правого барабана (второй метод измерения). гемоглобина находят по градуировочной кривой либо таблице. Определение гемоглобина в особых фотоэлектрических устройствах (ГФ-1 и др.) детально обрисовано в приложенных к ним руководствах.

Рис. 1. Смеситель для эритроцитов. Рис. 2. Последовательные этапы (1—3) изготовление мазка крови. Стрелки показывают направление движения стекла.

Подсчет эритроцитов и лейкоцитов создают в счетной камере либо в устройствах автоматического счета. Для счета эритроцитов в камере приготовляют разведение крови 1:200, пользуясь смесителем (меланжером) либо пробиркой. Смесители для эритроцитов (рис.

1) и лейкоцитов являются пипетки с расширением (ампулой) в середине, где помещена бусинка, размешивающая кровь, и с метками, показывающими, до какого именно места набирать кровь и разводящую ее жидкость.

Для разведения эритроцитов берут смеситель для эритроцитов и насасывают кровь через резиновую трубку, надетую на его верхний конец, до метки 0,5, а после этого 3% раствор хлорида натрия до метки 101. При насасывании нужно доводить количество точно до меток; нельзя допускать появления пузырьков воздуха в ампуле.

Вам это понравится:

Для определения концентрации гемоглобина в крови используются:

— унифицированный гемиглобинцианидный метод;

— гемихромный метод – новый колориметрический метод, не содержащий в составе реагентов ядовитых цианистых соединений;

— гематологические анализаторы.

Распространенный в прошлом метод определения гемоглобина по Сали недостаточно точный и в настоящее время не применяется.

Определение концентрации гемоглобина крови унифицированным гемиглобинцианидным методом

Принцип. Гемоглобин при взаимодействии с железосинеродистым калием (красной кровяной солью) окисляется в метгемоглобин (гемиглобин), образующий с ацетонциангидрином соединение красного цвета – гемиглобинцианид, интенсивность окраски которого пропорциональна содержанию гемоглобина.

Реактивы.

1. Трансформирующий раствор: ацетонциангидрин – 0,5мг; калий железосинеродистый – 0,2г; натрия гидрокарбонат – 1,0г; дистиллированная вода — до 1л. Раствор стабилен при комнатной температуре в течение нескольких месяцев при хранении в посуде из темного стекла.

Методы исследования крови

При обесцвечивании и появлении осадка непригоден.

2. Калибровочный раствор гемиглобинцианида – для построения калибровочного графика (при использовании ФЭКа). В настоящее время для определения гемоглобина крови в большинстве клинико-диагностических лабораторий пользуются готовыми наборами реактивов, выпускаемыми рядом фирм.

Специальное оборудование: ФЭК или МИНИГЕМ-540.

Ход определения. В пробирку с помощью градуированной пипетки или автоматического дозатора наливают точно 5мл трансформирующего раствора и вносят в него 0,02мл (капилляр Сали) крови, промывая капилляр 2-3 раза трансформирующим раствором. Тщательно перемешивают содержимое пробирки.

При этом получается разведение крови в 251 раз. Колориметрируют содержимое пробирки через 20 минут на МИНИГЕМе-540 или на ФЭКе при условиях: светофильтр зеленый (длина волны 520-560 нм), кювета 10мм; против трансформирующего раствора.

При использовании ФЭКа содержание гемоглобина определяют по калибровочному графику.

Дата публикования: 2014-11-02; Прочитано: 4211 | Нарушение авторского права страницы

studopedia.org — Студопедия.Орг — 2014-2018 год.(0.001 с)…

Патологические формы гемоглобина

HbS – гемоглобин серповидно-клеточной анемии.

MetHb – метгемоглобин, форма гемоглобина, включающая трехвалентный ион железа вместо двухвалентного. Такая форма обычно образуется спонтанно, в этом случае ферментативных мощностей клетки хватает на его восстановление.

При использовании сульфаниламидов, употреблении нитрита натрия и нитратов пищевых продуктов, при недостаточности аскорбиновой кислоты ускоряется переход Fe2+ в Fe3+. Образующийся metHb не способен связывать кислород и возникает гипоксия тканей.

Для восстановления ионов железа в клинике используют аскорбиновую кислоту и метиленовую синь.

Hb-CO – карбоксигемоглобин, образуется при наличии СО (угарный газ) во вдыхаемом воздухе. Он постоянно присутствует в крови в малых концентрациях, но его доля может колебаться от условий и образа жизни.

Угарный газ является активным ингибитором гем-содержащих ферментов, в частности, цитохромоксидазы4-го комплекса дыхательной цепи.

HbA1С – гликозилированный гемоглобин. Концентрация его нарастает при хронической гипергликемии и является хорошим скрининговым показателем уровня глюкозы крови за длительный период времени.

Миоглобин тоже способен связывать кислород

Миоглобин является одиночнойполипептидной цепью, состоит из 153 аминокислот с молекулярной массой 17 кДа и по структуре сходен с β-цепью гемоглобина. Белок локализован в мышечной ткани.

Миоглобин обладает более высоким сродством к кислороду по сравнению с гемоглобином.

Это свойство обуславливает функцию миоглобина – депонирование кислорода в мышечной клетке и использование его только при значительном уменьшении парциального давления О2 в мышце (до 1-2 мм рт.ст).

Кривые насыщения кислородом показывают отличия миоглобина и гемоглобина:

  • одно и то же 50%-е насыщение достигается при совершенно разных концентрациях кислорода – около 26 мм рт.ст. для гемоглобина и 5 мм рт.ст. для миоглобина,
  • при физиологическом парциальном давлении кислорода от 26 до 40 мм рт.ст. гемоглобин насыщен на 50-80%, тогда как миоглобин – почти на 100%.

Таким образом, миоглобин остается оксигенированным до того момента, пока количество кислорода в клетке не снизится до предельныхвеличин. Только после этого начинается отдача кислорода для реакций метаболизма.

У гемоглобина есть молекулярные болезни

Серповидно-клеточная анемия

HbS – гемоглобин серповидно-клеточной анемии.

При этом нарушении в ДНК в результате точковой мутации триплет ЦТТ заменен на триплет ЦАТ, что влечет за собой включение в 6-м положении β-цепи вместоглутаматааминокислоты валина. Изменение свойств β-цепи влечет изменение свойств всей молекулы и формирование на поверхности гемоглобина “липкого” участка.

Методы определения количества гемоглобина в крови

При дезоксигенации гемоглобина участок “раскрывается” и связывает одну молекулу гемоглобина S с другими подобными. Результатом является полимеризация гемоглобиновых молекул и образование крупных белковых тяжей, вызывающих деформацию эритроцита и при прохождении капилляров гемолиз.

Схема отличия гемоглобина S от гемоглобина А и его полимеризация

Нарушение синтеза гемоглобина

Порфирии

Порфирии – это группа гетерогенных наследственных заболеваний, возникающих в результате нарушения синтеза гема и повышения содержания порфиринов и их предшественников в организме. Выделяютнаследственныеи приобретенныеформы порфирии.

Приобретенныеформы порфирий носят токсический характер и вызываются действием гексахлорбензола, солей свинца и других тяжелых металлов (ингибирование порфобилиногенсинтазы, феррохелатазы и др.), лекарственными препаратами (антигрибковый антибиотик гризеофульфин).

При наследственныхформах дефект фермента имеется во всех клетках организма, но проявляется только в одном типе клеток. Можно выделить две большие группы порфирий:

1. Печеночные– группа заболеваний с аутосомно-доминантными нарушениями ферментов различных этапов синтеза протопорфирина IX. Наиболее ярким заболеванием этой группы является перемежающаяся острая порфирия, при которой у гетерозигот активность уропорфириноген-I-синтазы снижена на 50%.

Заболевание проявляется после достижения половой зрелости из-за повышенной потребности гепатоцитов вцитохроме Р450 для обезвреживания половых стероидов, обострение состояния также часто бывает после приема лекарственных препаратов, метаболизм которых требует участия цитохрома Р450.

Потребление и снижение концентрации гема, необходимого для синтеза цитохрома Р450, активирует аминолевулинатсинтазу. В результате больные экскретируют с мочой большие количества порфобилиногена и аминолевулиновой кислоты. На свету порфириноген окисляется в окрашенные порфобилин и порфирин, и это является причиной потемнения мочи при ее стоянии на свету при доступе воздуха.

Симптомами являются острые боли в животе, запоры, сердечно-сосудистые нарушения, нервно-психические расстройства.

2. Эритропоэтические– аутосомно-рецессивные нарушения некоторых ферментов синтеза протопорфирина IX в эритроидных клетках.

При этом смещается баланс реакций образования уропорфириногенов в сторону синтеза уропорфириногена I.

Симптомы заболевания схожи с предыдущим, но дополнительно наблюдается светочувствительность кожи, обусловленная наличием уропорфириногенов, кроме этого отмечаются трещины на коже и гемолитические явления.

Талассемии

Для талассемий характерно снижение синтеза α-цепей гемоглобина (α-талассемия) или β-цепей (β-талассемия). Это приводит к нарушению эритропоэза, гемолизу и тяжелым анемиям.

Источник: https://magictemple.ru/metody-opredelenija-gemoglobina/

Поделиться:
Нет комментариев

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.