Определение группы крови по системе аво

Содержание

Правила определения группы крови по системе АВО

Определение группы крови по системе аво

Процедура определения групп крови по системе АВО заключается в выявлении антигенов А и В в эритроцитах с помощью стандартных антител и использованием агглютининов в плазме или сыворотке анализируемой крови стандартными эритроцитами. Методика разработана в начале XX века и до сих пор активно применяется в медицине. Определение антигенов А и В осуществляется благодаря цоликлонам анти-А и анти-В.

Основные понятия

У доноров всегда определяются не только антигены в эритроцитах, но и агглютинины в сыворотке (плазме) с применением стандартных эритроцитов. В качестве биоматериала используется венозная кровь.

Перед исследованием необходимо отказаться от жирной пищи за сутки до анализа и не курить за полчаса до сдачи теста.

Группы крови определяют дважды: сначала в лечебном отделении, где заготавливается материал, а затем подтверждают исследованием в лаборатории.

Определение групп крови по системе АВО является основным тестом, который используется в трансфузиологии. Также подобная система групп крови есть у некоторых животных, например у шимпанзе, горилл и бонобо.

История открытия

В науке существует общепринятое мнение о том, что методика определения групп крови по системе АВО была выявлена впервые Карлом Ландштейнером, австрийским учёным, в 1900 году. Тогда он описал в своём труде три типа антигенов. За это через тридцать лет ему была присуждена Нобелевская премия по медицине и физиологии.

Из-за того, что между учёными раньше не было тесных связей, позже установили, что чешский врач-серолог Ян Янский независимо от изысканий К. Ландштейнера впервые описал четыре группы крови человека, но его исследования были не известны широкой аудитории. В настоящее время именно классификация, разработанная Я. Янским, применяется в России и республиках бывшего СССР.

В США У. Л. Мосс создал свою похожую работу в 1910 г.

Группа крови должна определяться в помещении с хорошим освещением с соблюдением диапазона температуры от 15 до 25 градусов Цельсия, так как отклонения от этой нормы могут повлиять на результаты исследования. На пластинке или тарелке пишутся инициалы и фамилия пациента.

Слева направо или по кругу наносят стандартные обозначения групп (О(I), A(II), В(III)). Под ними размещают по капле соответствующие сыворотки отдельными пипетками для каждого вида. Затем к ним добавляется кровь пациента. Материал для исследования берется из мочки уха или пальца.

Этого требует техника определения группы крови по системе АВО.

Правомерно также использование эритроцитов, находящихся в пробирке после того, как образовался сгусток. Нужно, чтобы количество сыворотки было больше количества добавленной крови в десять раз.

После этого капли перемешиваются стеклянными палочками (отдельно для каждой). В течение пяти минут, аккуратно покачивая пластинку, смотрят за появлением реакции гемагглютинации.

Она обнаруживается в том, что появляются маленькие красные комочки, сливающиеся затем в более крупные. Сыворотка в это время практически полностью теряет цвет.

Для того чтобы устранить ложную гемагглютинацию простого склеивания эритроцитов, нужно через три минуты добавить одну каплю физиологического раствора и проверить, сохраняется ли агглютинация. Если да, то она является истинной. Все, определение групп крови по системе АВО на этом завершено.

В результате могут наблюдаться четыре реакции:

  • не происходит агглютинация ни с одной из сывороток – первая группа О(I);
  • реакция проявилась с сыворотками I(ab) и III(a) – вторая группа А(II);
  • агглютинация наступает с сыворотками I(ab) и II(b) – третья группа В(III);
  • если реакция происходит с тремя сыворотками, нужно провести дополнительную процедуру с реактивами группы АВ(IV), которые являются стандартными; если агглютинация в такой капле отсутствует, можно считать, что это 4-я группа крови АВ(IV).

Экспресс-метод для резус-фактора

Методика определения групп крови по системе АВО предполагает одновременное выявление резус-фактора (Rh).

Поверхность пластинки предварительно смачивают и пишут на ней «контрольная сыворотка» и «сыворотка антирезус». Затем под надписями располагают одну-две капли нужных реактивов и добавляют к ним анализируемый материал.

Для этого также можно использовать кровь из пальца (в таком же количестве, как и объём сыворотки) или эритроциты, оставшиеся на дне пробирки после появления сгустка (половина объёма сыворотки). Выбор материала на конечный результат не влияет.

Затем кровь и сыворотка перемешиваются сухой стеклянной палочкой, после чего в течение пяти минут ожидают наступления реакции. Для того чтобы устранить ложные показания, через три-четыре минуты добавляют изотонический раствор натрия хлорида (всего несколько капель).

Определение группы крови по системе АВО и Rh проводится очень часто.

Если агглютинация эритроцитов в капле с сывороткой происходит, это указывает на положительный резус крови. По статистике Rh+ встречается у 85 % населения планеты.

Отсутствие её позволяет говорить о резус-отрицательной принадлежности. Если агглютинация появилась в контрольной сыворотке, значит она пришла в негодность.

К сожалению, алгоритм определения группы крови по системе АВО не всегда срабатывает идеально.

Какие ошибки могут быть допущены при данной методике?

Неточности при определении принадлежности крови той или иной группе зависят от следующих причин:

  • Технических.
  • Биологической специфики исследуемой крови.
  • Неполноценного характера стандартных сывороток и эритроцитов.

Технические ошибки

Возможные погрешности при определении группы крови системы АВО перекрестным способом:

  • Неправильно расположенные на пластинке сыворотки.
  • Неверные количественные пропорции материала.
  • Использование недостаточно чистых тарелок или пластинок, которые соприкасаются с кровью (каждая сыворотка должна набираться отдельной пипеткой, промывать которую нужно раствором хлорида натрия (в концентрации 0,9 %)).
  • Неверная запись анализируемого материала.
  • Несоблюдение времени, необходимого для наступления агглютинации, – спешить и учитывать реакцию до истечения пяти минут не следует, потому что в крови могут быть слабые агглютиногены. Передерживать также не стоит, потому что капли могут подсохнуть с краёв и привести к ложному заключению. Важно соблюдать правила определения группы крови по системе АВО.
  • Ошибочное центрифугирование тоже может привести к ложному результату.
  • Температура воздуха, превышающая допустимую, влияет на отсутствие агглютинации. Чтобы избежать ошибок подобного рода, нужно использовать специальную сыворотку, предназначенную для работы в жарком климате. Определять группы крови нужно на тарелке или пластинке, внешняя поверхность которых опускается в холодную воду.

Ошибки биологической специфики

Погрешности, связанные с биологической спецификой анализируемой крови, делятся на два типа.

  • Зависящие от особенностей эритроцитов.
  • Ошибки, обусловленные биологическими особенностями сыворотки.

Рассмотрим каждый вид более подробно.

Зависящие от особенностей эритроцитов

  • Поздняя агглютинация, объясняющаяся «слабыми» формами эритроцитов и антигенов. Для того чтобы избежать ошибок, определять группу крови доноров и реципиентов нужно с использованием стандартных эритроцитов. Индентифицировать агглютиноген А2 следует повторным исследованием с другими видами реагентов и другой посуды, увеличив время регистрации реакции.
  • «Панагглютинация» («аутоагглютинация») – умение крови проявлять одинаковую реакцию неспецифического характера со всеми сыворотками, в том числе с собственной. Через пять минут острота такой агглютинации слабеет, хотя должна усиливаться. Подобные случаи наблюдаются у онкобольных, обожжённых и др. В качестве контроля необходимо оценить проявление агглютинации анализируемых эритроцитов в стандартной сыворотке четвёртой группы и физрастворе. При «панагглютинации» группу крови определяют в результате тройного отмывания эритроцитов. Если оно не даёт нужного результата, стоит произвести повторный забор образца крови в согретую перед процедурой пробирку и поставить пробу в термоконтейнер, чтобы способствовать поддержанию температуры 37 градусов Цельсия и выше. Затем следует доставить в лабораторию, где сохраняется указанная выше температура и используются подогретые физиологический раствор, пластинка и реактивы.
  • Иногда эритроциты анализируемой крови располагаются как «монетные столбики», и их можно принять за агглютинаты. Если добавить две капли изотонического раствора и мягко покачать планшет, красные кровяные клетки занимают правильную позицию.
  • Неполная или смешанная агглютинация, встречающаяся у пациентов со второй, третьей и четвёртой группами в результате трансплантации костного мозга или в первые три месяца после переливания крови 0(I).
  • Во время рутинного тестирования в результате предыдущей сенсибилизации выявляются антитела иной специфичности. Нужно определить её и подобрать эритроциты без содержания антигена, к которому обнаружена иммунизация. Реципиенту нужно обязательно подбирать совместимую донорскую кровь индивидуально.
  • Отсутствуют антитела А и В, что наблюдается у новорожденных и больных, страдающих от угнетения гуморального иммунитета.
  • При образовании «монетных столбиков» аномальный результат нужно подтвердить, взяв стандартные эритроциты первой группы. Раствор хлорида натрия и покачивание планшета помогают дифференцировать настоящие агглютинаты и «монетные столбики».

Слабые сыворотки с прошедшим сроком годности или имеющие титр меньше 1:32 способны зарождать слабую и позднюю агглютинацию. Применение таких реактивов недопустимо.

Использование негодных стандартных эритроцитов или сывороток, приготовленных в нестерильных условиях и законсервированных в недостаточной степени, приводит к появлению «бактериальной» агглютинации, имеющей неспецифическую природу.

Существует множество популярных предположений о группах крови системы АВО, появившихся непосредственно после её обнаружения в разных мировых культурах. Так, например, в 30-е годы прошлого столетия в Японии и некоторых других странах получила популярность теория, связывающая группу крови с тем или иным типом личности. Подобные теории популярны и на сегодняшний день.

Есть также мнение, что человек, имеющий группу А, подвержен тяжёлому похмелью, О связана с хорошими зубами, а группа А2 – с самым высоким уровнем IQ. Но научно такие утверждения не доказаны.

[attention type=yellow]
Мы рассмотрели определение групп крови по системе АВО с помощью стандартных сывороток.
[/attention]

Источник: https://FB.ru/article/334005/pravila-opredeleniya-gruppyi-krovi-po-sisteme-avo

Плазменные антигены

Определение группы крови по системе аво

Плазменные(сывороточные) антигены представляютсобой определенные комплексы аминокислотили углеводов на поверх­ности молекулбелков плазмы (сыворотки) крови.

ПОНЯТИЕ О ГРУППЕКРОВИ

ГРУППАКРОВИ— этосочетание нормальных иммунологическихи генетических признаков крови, кото­роенаследственно детерминировано и являетсябиоло­гическим свойством каждогоиндивидуума.

Группыкрови передаются по наследству,формируются на3-4 меся­цевнутриутробного развития и остаютсянеизменными в течение всей жизни.Считается, что у человека группа кровивключает несколько де­сятков антигеновв различных сочетаниях. Этих сочетаний— группкрови— реальноможет быть несколько миллиардов.Практически они оди­наковы лишь уоднояйцевых близнецов, имеющих один итот же генотип.

Впрактической медицине термин «группакрови», как правило, отражает сочетаниеэритроцитарных антигенов системы АВОи резус-фактора и соответствующихантител в сыворотке крови.

ГРУППОВЫЕ АНТИТЕЛА

Длякаждого известного антигена обнаруженыодно­именные антитела (анти-А, анти-В,анти-резус, анти-Келл и т. д.). Груп­повыеантитела крови— не такоепостоянное свойство организма челове­ка,как антигены. Лишь в групповой системеАВО антитела являются нормальнымврожденным свойством плазмы крови. Этиантитела (агглю­тинины а и b)постоянно присутствуют в плазме кровичеловека.

1. Группы крови по системе аво

Подтермином «совместимость»понимают сочетание крови донора иреципиента по антигенам и антителам,не вызывающее иммунологи-ческихвзаимодействий.

Взависимости от наличия в эритроцитахагглютиногенов А и В, а в сывороткесоответствующих им агглютининов а и b,все люди разделены на четыре группы:

• ГруппаО (I)— в эритроцитах агглютиногенов нет, всыворотке агглютинины а и b.

• ГруппаА(II) — вэритроцитах агглютиноген А, в сывороткеагг­лютинин b.

• ГруппаВ (III)— в эритроцитах агглютиноген В, всыворотке агг­лютинин а.

• ГруппаАВ (IV)— вэритроцитах агглютиногены А и В,агглюти­нинов в сыворотке нет.

АнтигенА не является однородным, существуетдва основных его подтипа: В соответствиис этим группа А(II) имеетдве подгруппы А(П) и А2(II), а группаАВ(IV) — АВ(IV) и А2В(IV).

Групповойантиген В отличается большей однородностью,хотя описаны редкие его варианты. Однакосущественного кли­нического значенияэто не имеет.

Методика определения групп крови

Групповаяпринадлежность крови по системе АВОоп­ределяется с помощью реакцииагглютинации. В настоящее времяис­пользуют три способа определениягрупп крови по системе АВО:

• постандартным изогемагглютинирующимсывороткам,

• постандартным изогемагглютинирующимсывороткам и стандар­тным эритроцитам(перекрестный способ),

• спомощью моноклональных антител(цоликлонов анти-А и аити-В).

Приплановом исследовании врач стационараопределяет группу кро­ви по стандартнымизогемагглютинирующим сывороткам илис помощью цоликлонов, после чего посылаеткровь в серологическую лабораторию дляпроверки группы перекрестным методом.

Группакрови считается определенной толькотогда, когда лаборато­рия подтвердиладанные, полученные врачом стационара.Если резуль­таты исследованийрасходятся между собой, оба исследованиянужно повторить.

В экстренномпоряд­ке (при кровотечении необходимосрочное переливание крови), врачста­ционара определяет группу сам (влаборатории перепроверка произво­дится,но постфактум).

ОПРЕДЕЛЕНИЕГРУПП КРОВИ ПО СТАНДАРТНЫМИЗОГЕМАГГЛЮТИНИРУЮЩИМ СЫВОРОТКАМ

Наиболее распространенв клиничес­кой и лабораторной практике.

Сутьметода сводится к обнаружению в испытуемойкрови групповых антигенов А и В с помощьюстандартных изогемагглютинирующихсы­вороток. Проводят в помещении схорошим освещением при темпера­туре15-25°С.

а) Необходимоеоснащение

• Стандартныеизогемагглютинирующие сыворотки группО(I), А(II), В(III) и АВ(IV) двухразличных серий. Сыворотка должна бытьпрозрачной, без признаков гниения.

Дляудобства стандартные гемагглютинирующиесыворотки различ­ных групп подкрашиваютв определенный цвет: О (I)— бесцвет­ная (серая), А(II) — синяя,В(III) —красная, АВ(IV) —ярко-желтая.

Следует отметить, чтоуказанные цвета сопутствуют всемэтикеткам на препаратах крови, имеющихгрупповую принадлеж­ность (кровь,эритроцитная масса, плазма и др.).

• Белыефарфоровые или эмалированные тарелкиили любые дру­гие пластинки сосмачиваемой поверхностью, маркированные0(1),А(П), В(Ш), AB(IV).

• Изотоническийраствор хлорида натрия.

• Иглы,пипетки, стеклянные палочки (предметныестекла).

б) Техника проведенияреакции

1.На тарелку (пластинку) наносят стандартныеизогемагглютииирующие сыворот­ки I,II,Ш групп в объеме0,1 мл (однабольшая капля около1 см вдиаметре). Во избежание ошибок наносятдве серии сывороток каждой из групп.Всего получается6 капель.

2.

Шесть ка­пель исследуемой кровивеличиной приблизительно с булавочнуюголовку0,01 мл(маленькая капля) последовательнопереносят су­хой стеклянной палочкойна пластину в6 точек,каждую рядом с каплей стандартнойсыворотки (количество испытуемой кровидол­жно быть приблизительно в10 раз меньшеколичества стандартной сыворотки),потом их осторожно с по­мощью стеклянныхпалочек с закругленными краямиперемеши­вают.

3.После смешивания тарелку периодическипокачивают.

Агглютинацияначинается в течение первых10-30 секунд.

4.В те капли, где произошла агглютинация,добавляют по одной капле изотоническогораствора хлорида натрия, после чегооценивают ре­зультат реакции.

Приположительной реакции обычно в течениепервых10-30 секундв смеси появляются видимые невооруженнымвзглядом мелкие красные зернышки(агглютинаты), состоящие из склеенныхэритроцитов.

Еслисыворотки всех трех групп далиположительную реакцию, это указываетна то, что испытуемая кровь содержитоба агглютиногена— А и В ипринадлежит к группе AB(IV).

Однако в таких случаях для исключениянеспецифической ре­акции агглютинации(холодовая агглютинация, пангглютинация,аллергия) необходимо провестидополнительное контрольное исследованиеиспытуемой крови со стандартнойизогемагглютинирующей сывороткойгруппы AB(IV),не содержащей агглютининов.

Лишьотсутствие агглютинации в этой каплепри наличии агглютинации в каплях,содержащих стандартные сыворотки групп0(1), A(II)и B(III),позволяет считать реакцию специфическойи отнести исследуемую кровь к группеАВ0(IV).

Следуетотметить, что при наличии в исследуемойкрови слабого под­типа антигена А,реакция агглютинации с гемагглютинирующимисы­воротками групп0(1) и В(Ш)начинается позже (на3-4 минуте).Для точного определения подтипа антигенаА необходимо проведение допол­нительнойреакции с так называемым анти-А, реактивом.

ОПРЕДЕЛЕНИЕГРУПП КРОВИ ПО СТАНДАРТНЫМИЗОГЕМАГГЛЮТИНИРУЮЩИМ СЫВОРОТКАМ ИСТАНДАРТНЫМ ЭРИТРОЦИТАМ (ПЕРЕКРЕСТНЫЙСПОСОБ)

Способнаиболее часто используется всерологических лабораториях. Сутьметода состоит в определении наличияили отсутствия в иссле­дуемой кровигрупповых антигенов А и В с помощьюстандартных изо-гемагглютинирующихсывороток, а также групповых антител аи bс по­мощью стандартных эритроцитов.

• Оснащениедля реакции со стандартными эритроцитамиотлича­ется тем, что для реакцииагглютинации необходимы стандарт­ныеэритроциты трех групп крови:0(1), А(II),В(III).

• Стандартныеэритроциты приготавливают из кровидоноров с за­ранее известной группойкрови, хранят при 4-8°С.

Намаркированную тарелку пипеткой в шестьячеек наносят по од­ной большой каплесыворотки исследуемой крови из пробирки(0,1мл), а рядом с ними— по одноймаленькой капле (0,01мл) стан­дартныхэритроцитов групп0(1), А(П),В(Ш) (по две серии).

Особенностьютрактовки результатов реакции состандартными эрит­роцитами являетсято, что эритроциты группы0(1) являютсяконтрольны­ми (в них нет антигенов,что делает принципиально невозможнойспеци­фическую реакцию агглютинациис любой сывороткой).

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУППКРОВИ МОНОКЛОНАЛЬНЫМИ АНТИТЕЛАМИ

Дляопределения группы крови используютсямоноклональные анти­тела, для получениякоторых применяется гибридомнаябиотехнология.

Гибридома— этоклеточный гибрид, образованный путемслияния клетки опухоли костного мозга(миеломы) с иммунным лимфоцитом,син­тезирующим специфическиемоноклональные антитела. Гибридомапри­обретает свойства обоих «родителей»:способность к неограниченному росту,характерную для опухолевой клетки, ивозможность синтезиро­вать антитела,присущую иммунному лимфоциту.

Разработаныстандартные реагенты—моноклональные антитела (МКА): цоликлоныанти-А и анти-В, которые применяют дляопределе­ния агглютиногенов эритроцитов.Цоликлоны представляют из себялиофилизированный порошок красного(анти-А) или синего (анти-В) цве­та,который разводят изотоническим растворомхлористого натрия непосредственноперед исследованием.

Цоликлоныанти-А и анти-В наносят на белый планшетпо одной боль­шой капле(0,1 мл) подсоответствующими надписями: анти-А илианти-В. Рядом с каплями антител наносятпо одной маленькой капле (0,01мл) исследуемойкрови. После перемешивания составныхчастей за реакци­ей агглютинациинаблюдают в течение2-3 мин.

ОПРЕДЕЛЕНИЕРЕЗУС-ФАКТОРА

В1940 г. К.Ландштейнер и А. С. Винер обнаружили вэритроцитах человека совершенно новыйантиген, названный ими ре­зус-фактором(Rh).Резус-фактор присутствует в крови85% людей, а15%лиц этого фактора не содержат. Так онназван, по имени макаки Резус, у которойон всегда имеется.

Антигенырезус относят к липопротеидам. Ониявляются очень актив­ными и способнывызывать образование иммунных антител.

Наличиерезус-антигена выявляется у человеческогоплода начиная с5-8 неделии хорошо выражено у 3-4-месячного эмбриона.

Источник: https://StudFiles.net/preview/4081371/page:33/

Группы крови человека: классификация по системе АВО, стандартный метод определения и исследование антигенов

Определение группы крови по системе аво

Каждый человек должен знать свою группу крови – это необходимо не только для того, чтобы оказавшись реципиентом, получить при переливании кровь, совместимую с собственной, но и для того, чтобы самому при необходимости стать донором для нуждающегося. Непосредственно перед переливанием выполняется определение резус-фактора и обязательно делается проба на совместимость.

В медицинской практике групповая принадлежность крови у людей в основном определяется в системе АВО, открытой Ландштейнером.

Именно точность и простота определения групповой принадлежности крови в лабораторных условиях и понятность для всех сделали эту систему основной.

Основные группы крови и антигены

Рассматриваемая ниже система определения группы крови человека получила название АВО от антигенов, находящихся в эритроцитах. Антигены условно обозначаются буквами А и В.

В эритроцитах данные антигены могут встречаться отдельно, вместе или полностью отсутствовать, что дает возможность разделить всех жителей планеты на 4 основные группы.

Таблица «Классификация групп крови людей в системе АВО»:

Группа кровиАнтигены
Цифровое обозначениеБуквенное обозначение
10
IIАА
IIIВВ
IVАВА, В

В крови около 85 % населения содержится специфический антиген, связанный с эритроцитами, который называется резус-фактором (Rh) по имени обезьяны макаки-резус, эритроциты которой были использованы в опытах по выявлению этого фактора.

Лица, эритроциты которых содержат Rh-фактор, обозначаются как резус-положительные, а при отсутствии Rh-фактора — как резус-отрицательные.

При переливании крови всегда учитывается не только групповая совместимость, но и совместимость по резус-фактору. Переливанию подлежит кровь донора той же группы, что и у больного.

Непосредственно перед переливанием проводят:

  • Повторное определение группы крови донора и больного
  • Определение резус-фактора
  • Пробу на совместимость
  • 3-кратную биологическую пробу

Наряду с основной системой АВО, определяющей совместимость и несовместимость переливаемой крови, существует ряд определений групп крови, предложенных другими авторами.

Как видно в обиходе группы крови обозначаются:

  • I группа, или 0 (нулевая)
  • II группа, или А
  • III группа, или В
  • IV группа, или АВ

Эритроцитам группы крови О (I) соответствует Н-антиген. Поэтому в медицинской литературе можно встретить обозначение системы АВО как системы АВО (Н).

Комбинация антигенов А и В не произвольна, а строго закономерна. Поэтому принадлежность к определенной группе крови является также строго индивидуальным свойством, которое сохраняется с момента рождения в течение всей жизни человека.

Современная наука говорит о том, что в крови человека (в его эритроцитах) имеются различные вещества — носители чужеродной информации. Эти вещества называются антигенами. Располагаются антигены на мембране (оболочке) эритроцитов.

В процессе развития иммунологии и генетики выяснилось, что многообразное различие свойственно не только красным кровяным тельцам (эритроцитам), но и другим клеточным элементам крови: лейкоцитам, тромбоцитам, а также плазменным белкам.

Уже выявлено более 500 антигенов крови человека, которые в свою очередь включают более 40 антигенных систем. Каждая из этих систем включает в себя десятки антигенов.

Кроме основной, широко распространенной системы определения группы крови АВО, в настоящее время различают эритроцитарные, лейкоцитарные, тромбоцитарные и сывороточные группы крови, число которых необычайно велико.

Для более четкого понимания достаточно привести следующий пример. Только в антигенной системе Rh (резус-фактор) в настоящее время выделено более 27 групп крови, а по лейкоцитарной антигенной системе HLA выделено более 16 миллионов групп.

В настоящее время не только открыты, но и хорошо изучены антигены следующих систем групп крови: Rh (резус-фактор), MNSs, Kell, Duffy, Kidd и др.

Наряду с широко распространенными описаны довольно редко встречающиеся антигены. Например, антиген Виа найден Андерсоном с сотрудниками в 1963 г. Встречается лишь у 1 человека на 1000 обследованных. Антиген Вх, встречается еще реже: лишь у одного на 3000 обследованных. В литературе описаны и еще более редко встречающиеся у человека антигены.

Можно предположить, что число вариантов сочетаний антигенов в крови человека настолько велико у разных людей, что каждый человек в итоге имеет свою индивидуальную, присущую только ему группу крови.

Сведения о группе крови обычно содержатся в медицинских документах. Определение группы крови практически производится в любой клинико-диагностической лаборатории. Для этой цели используется набор стандартных сывороток.

Определение основано на реакции агглютинации, если в сыворотке одной смешиваемой крови содержится агглютинин, а в эритроцитах другой крови — агглютиноген.

В сыворотке крови могут присутствовать агглютинины А и В, а в эритроцитах (на их мембранах) присутствуют агглютиногены А и В. Реакция агглютинации происходит в том случае, если агглютиноген А совпадает с агглютинином А, если агглютинин в совпадает с агглютиногеном В.

В крови одного и того же человека не могут находиться одновременно одинаковые агглютинины и агглютиногены, иначе произошла бы агглютинация собственных эритроцитов, приводящая к смерти.

По наличию или отсутствию в эритроцитах агглютиногенов, а в сыворотке — агглютининов всех людей разделили на четыре группы. Эти группы были разобраны выше.

Стандартные сыворотки I, II и III групп обладают реакцией изоагглютинации, т. е. способностью склеивать эритроциты. Сыворотка IV группы крови изоагглютинацией не обладает, так как не содержит агглютининов.

Стандартные сыворотки выпускаются в запаянных ампулах и сохраняются в прохладном месте.

Техника определения группы крови

Техника определения группы крови довольно проста, но требует внимательности от лаборанта.

На чистом предметном стекле или на фаянсовой тарелке делают восковым карандашом пометки соответственно наименованиям сывороток О, А, В.

Вблизи пометок разными пипетками наносят по капле различных стандартных сывороток. Рядом с каждой каплей помещают по капле исследуемой крови, которую берут из пальца. Кровь быстро смешивают с каплей сыворотки при помощи трех разных чистых стеклянных палочек.

Затем предметное стекло или тарелочку слегка покачивают, наблюдая в течение 4—5 мин, где произошла агглютинация. Потом добавляют к каждой капле по капле физиологического раствора и смесь перемешивают.

Если агглютинации не произошло, то кровь с сывороткой остается равномерно мутной:

  • О (I) — реакция агглютинации отсутствует во всех трех каплях
  • А (II) — реакция агглютинации наступила с сыворотками I и III групп
  • В (III) — реакция агглютинации наступила с сыворотками I и II групп
  • АВ (IV) — реакция агглютинации наступила с сыворотками всех трех групп

По статистическим данным, распространимость людей с разными группами крови следующая (%):

  • О (I) группа — 40
  • А (II) группа — 39
  • В (III) группа — 15
  • АВ (IV) группа — 6

При стандартном методе определения группы крови по простому алгоритму возможны ошибки за счет образования монетных столбиков (ложной агглютинации) при сгущении крови. В этих случаях сыворотку разводят физиологическим раствором в 2 раза, и монетные столбики исчезают.

Также при определении группы крови может наблюдаться неспецифическое склеивание эритроцитов под влиянием сывороток всех групп (феномен Томсона). В таких случаях группу крови определяют не только прямым, но и обратным методами.

Обратный метод (перекрестный способ) состоит в следующем: на предметное стекло наносят по капле стандартных эритроцитов из группы А и В и прибавляют по капле сыворотки исследуемого лица.

Появление агглютинации в обеих каплях говорит о принадлежности крови к О (I) группе, а при отсутствии агглютинации — к АВ (IV) группе.

Агглютинация эритроцитов А (II) группы указывает на В (III) группу. Если произошла агглютинация эритроцитов группы В (III), то, следовательно, это кровь А (II) группы.

В сущности, группа крови должна определяться у каждого новорожденного, фиксироваться в медицинской документации и сопровождать человека в течение всей его жизни, чего, к сожалению, не делается.

В то же время имеется определенная категория лиц, у которых в обязательном порядке определяют группу крови и резус-фактор: беременные, призывники в военкомате, доноры, больные перед плановой операцией и др.

Данные группы крови заносятся в паспорт или военный билет, а у доноров — в удостоверение донора.

Источник: https://bigmun.ru/gruppy-krovi-klassifikaciya/

Определение группы крови: цоликлоны, стандартные сыворотки и перекрестный способ

Определение группы крови по системе аво

Определение группы крови и резус-фактора делятся на два способа:

Экспресс-диагностика (первичное определение группы крови и Rh-фактора) не учитывает антигены Келл, не говоря уже про другие системы верификации. Поэтому цоликлоны применяют только для первичного определения группы крови и резус-фактора и при экстренных показаниях трансфузии компонентов крови.

Подробнее о самой редкой группе крови в Мире можно найти здесь.

Определение группы крови и резус-фактора цоликлонами анти-А, анти-В и Анти-D супер является наиболее современным и относительно простым методом. Для определения группы крови используются цоликлоны, т.е. моноклональные антитела.

Что требуется для определения группы крови и резус-фактора?

цоликлон анти-А;

цоликлон анти-В;

цоликлон анти-D;

– раствор натрия хлорида 0,9 %; специальный планшет; стерильные палочки.

Алгоритм и порядок определения группы крови

Нанести цоликлоны анти-А, анти-В на специальный планшет по одной большой капле (0,1 мл), под соответствующими надписями.

Рядом с ними капнуть исследуемую кровь (0,01–0,03 мл) по одной маленькой капле. Перемешать их и наблюдать за наступлением или отсутствием реакции агглютинации в течение 3 мин. При сомнительном результате добавить 1 каплю 0,9% физиологического раствора.

 Расшифровка результатов определения группы крови

  • если реакция агглютинации наступила с анти-А цоликлоном, то исследуемая кровь относится к группе А (II);
  • если реакция агглютинации наступила с анти-B цоликлоном, то исследуемая кровь относится к группе B (III);
  • если реакция агглютинации не наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе 0 (I);
  • если реакция агглютинации наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе AB (IV), как показано на рисунке.

AB (IV)

Определение резус-фактора цоликлоном Анти-D

На планшете смешивают большую каплю (0,1 мл) анти-D цоликлона и маленькую каплю (0,01 мл) исследуемой крови пациента. За наступлением реакции агглютинации или её отсутствием наблюдают в течение 3 мин.

  • если реакция агглютинации наступила с цоликлоном анти-D , то исследуемая кровь относится к резус-положительной (Rh+)
  • если реакция агглютинации не наступила с цоликлоном анти-D, то исследуемая кровь относится к резус-отрицательной (Rh—)

AB (IV)Rh-

Другими словами, при смешивании цоликлона Анти-D с резус-положительными эритроцитами наступает реакция агглютинации, а если кровь резус-отрицательная — агглютинация отсутствует (как показано на рисунке — четвертая группа крови резус-отрицательная).

Определение групп крови стандартными изогемагглютинирующими сыворотками — поиск и обнаружение в крови антигенов А и В с помощью реакции агглютинации. Для достижения цели используют:

  • Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки групп крови О (I) — бесцветная, А (II) — синяя, В (III) — красная, АВ (IV) — жёлтая.
  • Белые тарелки, маркированные группами крови: 0 (I), А (II), В (III), AB (IV).
  • NaCl 0,9%
  • Стеклянные палочки
  1. Подписать тарелку (Ф.И.О. пациента);
  2. Нанести обозначения двух серий стандартных сывороток I, II и III групп крови в объёме 0,1 мл, образующие два ряда по три капли слева направо: 0 (I), А (II), В (III);
  3. Забрать кровь из вены. Шесть капель исследуемой крови пациента перенести стеклянной палочкой на пластину в шесть точек рядом с каплей стандартной сыворотки и перемешать.

Агглютинация начнется через 30 сек. В те капли, где произошла агглютинация, добавить по одной капле NaCl 0,9% и оценить результат.

Оценка результатов определение группы крови стандартными сыворотками

Положительная реакция агглютинации может быть пескообразной или лепестковой. При отрицательной реакции капля остаётся равномерно окрашенной в красный цвет. Результаты реакций в каплях с сыворотками одной и той же группы (двух серий) должны совпадать.

Принадлежность исследуемой крови к соответствующей группе определяют по наличию или отсутствию агглютинации при реакции с соответствующими сыворотками после наблюдения в течение 5 мин.

При этом следует отметить, что если сыворотки всех трёх групп дали положительную реакцию, это указывает на то, что испытуемая кровь содержит оба агглютиногена (А и В) и принадлежит к группе AB (IV).

Однако в таких случаях для исключения неспецифической реакции агглютинации необходимо провести дополнительное контрольное исследование испытуемой крови со стандартной изогемагглютинирующей сывороткой группы AB (IV), не содержащей агглютининов. Лишь отсутствие агглютинации в этой капле при наличии агглютинации в каплях, содержащих стандартные сыворотки групп 0 (I), А (II) и В (III), позволяет считать реакцию специфической и отнести исследуемую кровь к группе АВ (IV).

Определение группы крови перекрестным способом — обнаружение наличия или отсутствия в исследуемой крови антигенов А и В с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток, а также антител α и β с помощью стандартных эритроцитов. Реакцию со стандартными сыворотками проводят описанным выше способом.

Для реакции со стандартными эритроцитами необходимы стандартные эритроциты трёх групп крови: 0 (I), А (II), B (III).

Методика проведения реакции со стандартными эритроцитами

  1. Кровь для исследования берут из вены в пробирку, центрифугируют или оставляют на 30 мин для получения сыворотки.

  2. На маркированную тарелку наносят три больших капли (0,1 мл) сыворотки крови из пробирки, а рядом с ними по одной маленькой капле (0,01 мл) стандартных эритроцитов групп.

  3. Соответствующие капли смешивают стеклянными палочками, планшет покачивают, наблюдают в течение 5 мин, в капли с агглютинацией добавляют NaCl 0,9% и оценивают результат.

Оценка результатов проведения реакции со стандартными эритроцитами

Оценивают результаты, полученные со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и стандартными эритроцитами. Особенность результатов реакции со стандартными эритроцитами — эритроциты группы 0 (I) считают контрольными.

Результат перекрёстного способа считают достоверным, если при  реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и со стандартными эритроцитами ответы о группе исследуемой крови совпадают.

Если этого не происходит, обе реакции следует переделать.

Источник: https://anest-rean.ru/gruppa-krovi/opredelenie/

Методика определения групп крови по системе АВО с помощью цоликлонов

Группа крови должна определяться в помещении с хорошим освещением с соблюдением диапазона температуры от 15 до 25 градусов Цельсия, так как отклонения от этой нормы могут повлиять на результаты исследования. На пластинке или тарелке пишутся инициалы и фамилия пациента.

Слева направо или по кругу наносят стандартные обозначения групп (О(I), A(II), В(III)). Под ними размещают по капле соответствующие сыворотки отдельными пипетками для каждого вида. Затем к ним добавляется кровь пациента. Материал для исследования берется из мочки уха или пальца.

Этого требует техника определения группы крови по системе АВО.

Правомерно также использование эритроцитов, находящихся в пробирке после того, как образовался сгусток. Нужно, чтобы количество сыворотки было больше количества добавленной крови в десять раз.

После этого капли перемешиваются стеклянными палочками (отдельно для каждой). В течение пяти минут, аккуратно покачивая пластинку, смотрят за появлением реакции гемагглютинации.

Она обнаруживается в том, что появляются маленькие красные комочки, сливающиеся затем в более крупные. Сыворотка в это время практически полностью теряет цвет.

Для того чтобы устранить ложную гемагглютинацию простого склеивания эритроцитов, нужно через три минуты добавить одну каплю физиологического раствора и проверить, сохраняется ли агглютинация. Если да, то она является истинной. Все, определение групп крови по системе АВО на этом завершено.

Толкование результатов

В результате могут наблюдаться четыре реакции:

  • не происходит агглютинация ни с одной из сывороток – первая группа О(I);
  • реакция проявилась с сыворотками I(ab) и III(a) – вторая группа А(II);
  • агглютинация наступает с сыворотками I(ab) и II(b) – третья группа В(III);
  • если реакция происходит с тремя сыворотками, нужно провести дополнительную процедуру с реактивами группы АВ(IV), которые являются стандартными; если агглютинация в такой капле отсутствует, можно считать, что это 4-я группа крови АВ(IV).

Обусловленные биологическими особенностями сыворотки

  • Во время рутинного тестирования в результате предыдущей сенсибилизации выявляются антитела иной специфичности. Нужно определить её и подобрать эритроциты без содержания антигена, к которому обнаружена иммунизация. Реципиенту нужно обязательно подбирать совместимую донорскую кровь индивидуально.

  • Отсутствуют антитела А и В, что наблюдается у новорожденных и больных, страдающих от угнетения гуморального иммунитета.
  • При образовании «монетных столбиков» аномальный результат нужно подтвердить, взяв стандартные эритроциты первой группы.

    Раствор хлорида натрия и покачивание планшета помогают дифференцировать настоящие агглютинаты и «монетные столбики».

Ошибки, связанные с применением неполноценных стандартных эритроцитов и сывороток

Слабые сыворотки с прошедшим сроком годности или имеющие титр меньше 1:32 способны зарождать слабую и позднюю агглютинацию. Применение таких реактивов недопустимо.

Использование негодных стандартных эритроцитов или сывороток, приготовленных в нестерильных условиях и законсервированных в недостаточной степени, приводит к появлению «бактериальной» агглютинации, имеющей неспецифическую природу.

Существует множество популярных предположений о группах крови системы АВО, появившихся непосредственно после её обнаружения в разных мировых культурах. Так, например, в 30-е годы прошлого столетия в Японии и некоторых других странах получила популярность теория, связывающая группу крови с тем или иным типом личности. Подобные теории популярны и на сегодняшний день.

Есть также мнение, что человек, имеющий группу А, подвержен тяжёлому похмелью, О связана с хорошими зубами, а группа А2 – с самым высоким уровнем IQ. Но научно такие утверждения не доказаны.

[attention type=yellow]
Мы рассмотрели определение групп крови по системе АВО с помощью стандартных сывороток.
[/attention] Источник: .ru

Источник: https://monateka.com/article/243011/

Поделиться:
Нет комментариев

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.