Определение группы крови и резус фактора цоликлонами

Содержание

Алгоритм определения группы крови (резус-фактора) цоликлонами и как сделать с помощью таблицы. Алгоритм определения группы крови цоликлонами

Определение группы крови и резус фактора цоликлонами

Цоликлоны для определения группы крови представляют собой антитела, получаемые по специальной технологии. Чтобы получить цоликлоны, используют лабораторных подопытных крыс. Грызунам делают инъекцию специального средства, а затем берут кровь из брюшины, она включает вещества, которые нужны для анализа.

Цоликлоны по своему составу относятся к иммуноглобулинам, они реагируют с антигенами, находящимися на оболочке эритроцитов. Типы этих веществ используются для выявления группы. Во время анализа цоликлоны разных видов вступают в реакцию с агглютиногенами, это дает возможность выявить группу и резус-фактор человека.

Препарат производят в жидком виде в бутылках по 5 и 10 мл. Каждый вид препарата обладает своими характеристиками.

Цоликлоны отличаются преимуществом перед другими сыворотками, т.к. не требуют долгой подготовки к обследованию и дают возможность сделать его быстро. Они не представляют собой человеческие клетки, ввиду чего при контакте с ними медики не смогут заразиться какой-либо инфекцией.

Подготовка к процедуре

В кабинете должна отсутствовать пыль, мухи, насекомые, которые могут помешать выполнению теста. Помещение должно быть хорошо освещено.

Флакон с цоликлонами должен быть плотно закрыт, чтобы реагенты не пересохли, в противном случае достоверность анализа снизится. Для определения группы крови и резуса при помощи цоликлонов нужна специальная подготовка.

В лабораторном кабинете температура воздуха может быть +15…+25ºC, в этом случае результат будет точным.

Перед анализом подготавливают нужные медицинские инструменты:

  • пробирку;
  • планшет, на который наносят реагент;
  • пипетки;
  • палочки для изъятия лабораторных образцов.

Если медицинский работник не только выполняет исследования, но и берет анализ у пациента, то надо подготовить:

  • жгут;
  • спирт для медицинской обработки;
  • одноразовый шприц;
  • пробирки;
  • ватный тампон;
  • салфетки;
  • специальный лабораторный маркер.

Как проводится исследование

Алгоритм определения группы крови цоликлонами состоит в следующем. Лабораторное тестирование осуществляется при помощи 3 видов этих веществ:

  • «Анти-A» красного цвета, такой же оттенок имеет бутыль, крышка и этикетка препарата.
  • «Анти-B» имеет синий цвет, а также крышку, бутыль и этикетку, окрашенные в синий тон.
  • «Анти-D» — бесцветный и находится в прозрачной бутылке.

При определении резус-фактора цоликлонами нельзя применять некачественные реагенты. Если флакон имеет дефекты или внутри жидкости есть осадок, то реагент потеряет свое действие.

Чтобы определить группу, медицинский работник наносит цоликлоны на лабораторную пластину, выполненную в виде таблицы. Наносятся реагенты разных типов (A, B и D). Каждый образец подписывается.

Цоликлон наносят на отмеченный участок. Каждый вид реагента берут своей пипеткой.

Рядом с сывороткой капают по 1 капле крови человека, затем чистой палочкой ее размешивают с реагентами. Через несколько секунд начнется реакция. Лаборант проводит наблюдение за реагентами 3 минуты. Потом можно расшифровывать результат анализа.

Метод перекрестной реакции

Данная техника заключается в определении агглютиногенов с помощью цоликлонов или стандартных сывороток с параллельным выявлением агглютининов при помощи эталонных эритроцитов.

Методика проведения практически не отличается от определения группы крови при помощи сывороток, однако, есть некоторые дополнения.

На планшетку ниже нанесенных сывороток добавляют по одной малой капле стандартных эритроцитов. После этого, из пробирки, содержащей прошедшую через центрифугу кровь пациента, извлекают с помощью пипетки плазму, которую добавляют к стандартным эритроцитам, а находящиеся на дне ее эритроциты вносят в стандартную сыворотку.

Также как и при методике стандартных сывороток, полученные результаты оценивают через несколько минут после начала реакции. При наличии агглютинации в стандартных сыворотках судят о наличии агглютининов системы АВ0, а при развитии реакции плазмы со стандартными эритроцитами – об имеющихся агглютиногенах.

Результаты исследования с применением сывороток и стандартных эритроцитов

Перекрестный метод получил широкое распространение благодаря тому, что он предотвращает основные диагностические ошибки при определении крови стандартными методиками.

Расшифровка результатов

Таблица сопоставления группы крови и цоликлона позволяет разобраться в результатах.

ЦоликлонI положительнаяI отрицательнаяII положительнаяII отрицательнаяIII положительнаяIII отрицательнаяIV положительнаяIV отрицательная
Анти-А++++
Анти-В++++
Анти-D++++
  1. Если отсутствует агглютинация (с анти-A и анти-B), эритроциты не содержат антигенов A и Б. Это I группа крови;
  2. Если есть агглютинация только с анти-A, эритроциты содержат лишь антиген A, что характеризует II группу крови;
  3. Если агглютинация только с анти-B, красные клетки содержат антиген B, что характеризует III группу;
  4. Если наблюдается агглютинация c обоими цоликлонамми анти-A и анти-B, эритроциты содержат оба антигена. С целью исключения аутоагглютинации необходимо провести контрольную процедуру: в этом случае смешивают 0,1 миллилитр изотонического раствора хлорида натрия и 0,01 миллилитр исследуемой крови. Если реакция агглютинации отсутствует, определяется IV группа.

Источник: https://GolovaNeBoli.ru/krov/opredelenie-gruppy-krovi-tsoliklonami-algoritm-dejstvij-rezus-faktora-kak-s-pomoshhyu-tablitsa.html

Простым языком об определении группы крови и резус-фактора с помощью цоликлонов

Определение группы крови и резус фактора цоликлонами

Свою группу крови, так же, как и резус-фактор, должен знать каждый человек. Это необходимо, в первую очередь, для собственной безопасности. Ведь никто из нас не застрахован и неизвестно что может приключиться с нашей жизнью в будущем. Знание группы крови позволит в необходимый и ответственный момент добиться быстрого переливания, которое может спасти жизнь.

Помните о том, что ни один врач не будет совершать инфузию крови без знания ее группы и резуса. Данная процедура может понадобиться в случае, если произошло ДТП, травма или еще какой – то неприятный случай, сопровождающийся повреждением целостности кожных покровов и, вследствие чего произойдет кровотечение.

Очень важно в такие моменты немедленно начать переливание, так как каждая минута здесь на вес золота. Чем скорее начнется процедура, тем вероятнее, что она пройдет без дальнейших осложнений для здоровья человека. Это касается неотложных случаев, но существуют и такие моменты, когда знание группы необходимо не срочно.

Это такие ситуации как: планирование проведения оперативного вмешательства, если вы хотите стать донором крови для кого – то, при наступлении беременности, для постановки на военный учет, при планировании беременности, для определения отцовства.

Во всех этих случаях, а также если вы хотите удовлетворить собственное любопытство необходимо сдавать кровь на определение ее группы и резуса.

Существует несколько методов, с помощью которых можно узнать эту информацию. Это определение группы с помощью сывороток или при помощи использования цоликлонов.

Последний метод является наиболее популярным, так как имеет несколько преимуществ, именно его мы и рассмотрим.

Что это за метод?

Прежде всего необходимо разобраться, что же представляет собой метод определения группы крови при помощи цоликлонов. И здесь мы сразу же сталкиваемся с новым словом, которое, скорее всего, ранее не слышали.

Цоликлоны, что это такое? Это специальный раствор антител, который связывается на поверхности эритроцитов с антигенами. Таким образом, происходит биохимическая реакция, в ходе которой врачи могут узнавать всю необходимую информацию по поводу группы крови или резус-фактора пациента.

Преимущество метода с цоликлонами в том, что в отличии от такового с сыворотками, с его помощью можно сразу же узнать и резус-фактор.

Стоит сразу отметить, что существует несколько разновидностей цоликлонов:

  • анти – А (представлен красной жидкостью);
  • анти – В (синяя жидкость);
  • анти – D (прозрачная жидкость).

Первые два цоликлона необходимы для определения группы крови. А вот третий, представленный в этом списке помогает определиться с резус-фактором. Данные разновидности цоликлонов выпускаются в небольших прозрачных флаконах, объем которых составляет 5 или 10 миллилитров.

Хранить его можно на протяжении двух лет в темном, недоступном для детей месте. Приобрести такой флакончик можно практически в любой аптеке, при необходимости можно заказать его на складе.

Помните о том, что при определении группы крови и резус – фактора ни в коем случае нельзя смешивать данные цоликлоны. Брать их необходимо разными пипетками, обычно каждый из них продается с отдельной пипеткой. В случае, если вы смешаете цоликлоны, то группа крови будет определена неправильно и вам нужно будет еще раз повторить процедуру.

Как установить группу с помощью анти-А, анти-В и анти-D?

Для того, чтобы узнать группу крови, необходимо прежде всего подготовить все необходимое для этого. Поэтому вам понадобится:

  • специальный планшет с семью небольшими лунками;
  • три цоликлона: анти – А, анти – В и анти – D;
  • три пипетки;
  • изотонический раствор натрий хлора;
  • шприц для забора крови;
  • спирт;
  • вата;
  • жгут.
  1. Начинать процедуру необходимо с забора крови. Обычно используют кровь, взятую из вены. Но в некоторых случаях применяют кровь из пальца. Набрав небольшое количество крови можно приступать к проведению самой процедуры.
  2. Проследите за тем, чтобы температура воздуха в помещении, где будет проводиться процедура была не более 25 С. Начинать необходимо с нанесения по одной небольшой капле цоликлонов в лунки планшета.
  3. В первую лунку капнуть цоликлон анти – А, во вторую анти – В и в ту, которая располагается сбоку поместить анти – D. Обратите внимание, что каждый вид цоликлона нужно наносить разными пипетками, чтобы они не имели возможности смешаться. В противном случае результаты нельзя считать достоверными и процедуру необходимо будет делать заново.
  4. После этого необходимо добавить по одной капле крови к каждому цоликлону и аккуратно смешать две эти жидкости.
  5. После этого нужно аккуратно раскачивать планшет на протяжении 3 минут.
  6. Результаты можно будет наблюдать уже после 10 – 15 секунд, но для более достоверного результата необходимо подождать 3 минуты. Предварительные результаты можно определять по истечению этого времени. Однако после этого необходимо в каждую лунку добавить по одной капле изотонического раствора хлорида натрия и смешать жидкости.
  7. После этого нужно на протяжении 3 – 5 минут раскачивать планшетку и уже затем окончательно определять группу и резус – фактор.

Источник: https://doctor-krov.com/analizy/opredelenie-gruppy-coliklonami.html

Цоликлоны для определения группы крови

Определение группы крови и резус фактора цоликлонами

Определение группы крови по цоликлонам — это простая процедура, которая проводится в лабораторных условиях. В ее основе лежит химическая реакция между моноклональными сыворотками и агглютиногенами.

В результате можно узнать не только группу крови, но и ее резус-фактор, и эти методики считаются наиболее простыми, точными и доступными. Вещества продаются в удобных флаконах разного объема и оснащены дозатором-капельницей.

Проведение анализа занимает несколько минут, благодаря чему в лабораториях можно в течение дня обработать огромное количество проб.

Что такое цоликлоны?

Цоликоны — это моноклональные антитела, которые находятся в солевом растворе.

Вещество получило свое название в честь его изобретателей — Центральный Ордена Ленина Институт, сегодня переименованный в Гематологический научный центр. Они представлены жидкостью, которая продается во флаконах объемом 5 и 10 мл.

Это универсальный реагент для гематологических исследований, поскольку позволяет определить группу крови как в системе АВ0, так в системе резус.

Выделяют 3 основные разновидности цоликлонов:

  • анти-А — жидкость красного цвета;
  • анти-В — синее вещество;
  • анти-D — прозрачный реагент для определения резус-фактора.

Для определения группы крови применяются цоликлоны анти-А и анти-В. Они вступают в биохимические реакции с агглютиногенами, которые расположены на поверхности эритроцитов — красных кровяных клеток.

Эритроциты группы крови А содержат агглютиноген А, который прореагирует с цоликлоном анти-А. Аналогично определяется содержание агглютингена В.

Положительным результатом реакции считается склеивание эритроцитов и выпадение их в осадок.

СПРАВКА! Агглютинация — это склеивание веществ. Агглютиногенами называются соединения, которые находятся на поверхности эритроцитов и вызывают их склеивание при соединении несовместимых групп крови.

Процедура определения группы крови

Процедура, как определить группу крови с помощью цоликлонов, очень проста и проводится за несколько минут. Для нее потребуется нативная («живая») капиллярная кровь, допускается наличие в ней консерванта. Также понадобится планшет — плоская поверхность из стекла, на которой будет происходить реакция. Процедуру проводят по определенному алгоритму:

  1. нанести две большие капли цоликлонов на поверхность планшета (обычно реагент анти-А находится слева, а анти-В — справа);
  2. добавить небольшие капли крови, которые по объему будут в 10 раз меньше реагентов;
  3. аккуратно двигать планшет, чтобы кровь смешалась с раствором, но две капли не соединились друг с другом;
  4. через несколько минут наблюдать результаты.

Для установления группы подойдет и кровь с добавлением консерванта. Однако простота методики позволяет проводить ее на месте непосредственно после взятия биологического материала. Достаточно набрать небольшое количество капиллярной крови из пальца, чтобы ее полностью хватило для проведения анализа.

Анализ проводится на специальном стеклянном планшете

Определение резус-фактора

Для определения резус-фактора понадобится цоликлон анти- D. Он представлен бесцветной жидкостью и также продается в небольших флаконах с дозатором. Чтобы провести реакцию, достаточно одной дополнительной капли крови, которую помещают на планшете отдельно. Процедура проводится по следующей схеме:

  1. нанести каплю цоликлона анти- D объемом 0,1 мл на стекло;
  2. рядом добавить каплю крови, объем которой составляет 0,01 мл;
  3. стеклянной палочкой соединить две жидкости и аккуратно шевелить стекло, чтобы кровь перемешивалась и реагентом;
  4. спустя 3 минуты зафиксировать результат.

Первые результаты могут просматриваться через 15 секунд, но для установления окончательного результата важно подождать 3 минуты. Наличие результата, то есть появление реакции агглютинации, говорит о том, что резус-фактор положительный, его отсутствие свидетельствует об отрицательном резусе.

СПРАВКА! Агглютинация выражается появлением красных хлопьев, состоящих из эритроцитов, которые можно увидеть невооруженным глазом, без специальных условий и оборудования.
Расшифровка анализов происходит по таблице, положительным результатом считается агглютинация эритроцитов

Полезные советы

Определение группы и резус-фактора крови с использованием цоликлонов считается одним из самых простых и доступных методов, поэтому широко применяется в лабораториях разного уровня. Кроме того, такой анализ дает достоверные результаты.

Однако в некоторых случаях они бывают ложными, а причиной этому становится несоблюдение нескольких правил.

Простая инструкция по применению цоликлонов и работа с ними позволит избежать получения недостоверных результатов и необходимости проводить исследование заново:

  • хранить реагенты в холодильнике, при температуре от 2 до 8 градусов, а распечатанный флакон использовать в течение 30 суток;
  • исследования проводятся при комнатной температуре, а в слишком жарком помещении рекомендуется периодически охлаждать стеклянную поверхность планшета;
  • обозначать на планшете разные цоликлоны маркером, поскольку их цвет после добавления крови быстро исчезает;
  • соблюдать правильные пропорции реагентов: если крови будет слишком много, реакция агглютинации эритроцитов будет мало выражена;
  • не допускать смешивания капель жидкости, в которых уже присутствуют разные типы цолкиклонов — в таком случае реакцию придется проводить заново;
  • обозначать окончательный результат не менее, чем через 3 минуты после начала реакции.

Важно также соблюдать последовательность действий во время анализа. Так, если стеклянную поверхность не раскачивать, даже при отсутствии реакции склеивания эритроциты будут расположены в краевой зоне капли. Это может стать причиной неправильной интерпретации результатов.

При определении группы крови необходимо учитывать острые и хронические заболевания, которые наблюдаются у пациента. При патологиях печени и органов кроветворной системы, а также болезнях, которые протекают по типу сепсиса, может происходить явление патагглютинации. Эритроциты будут склеиваться даже при контакте с обычным физиологическим раствором.

Напротив, при лейкозе кровяные клетки не отреагируют на присутствие антител, и агглютинация не произойдет.

Цоликлоны — это важные реагенты, которые используются ежедневно в гематологических лабораториях. Они позволяют быстро и безошибочно определить группу крови и ее резус без дополнительного оборудования и специальных навыков. Однако важно выполнять простой алгоритм, чтобы результаты анализа действительно были достоверными.

Источник: https://icvtormet.ru/krov/coliklony-opredeleniya-gruppy

Определения группы крови и резус-фактора цоликлонами

Определение группы крови и резус фактора цоликлонами

Цоликлоны – моноклинальные антитела, которые были получены из крови мышей с помощью генной инженерии и используются для определения группы крови системы АВО и резус-фактора.

Цоликлоны, в противовес стандартным сывороткам, отличаются высокой активностью и авидностью (временем наступления, а также выраженностью склеивания (реакции агглютинации).

Основные цоликлоны:

  • Анти-A,
  • Анти-B,
  • Анти-AB,
  • Анти-0 и т.д.

По цоликлонам определяют резус-фактор и группы крови.

Техника определения групп с помощью цоликлонов

Определение данным методом производится в лабораторных условиях. Температура воздуха должна находиться в пределах +15 – + 25 градусов по Цельсию. Исследование должно проводиться при достаточно хорошем освещении.

Реагенты необходимо хранить плотно закрытыми, так как при высыхании значительно снижается активность антител.

Нельзя использовать содержащие хлопья и мутные реагенты. Для каждого из реагентов требуется отдельная пипетка.

Анализ проводится на белой тарелке или планшете с хорошо смачиваемой поверхностью. Благодаря высокой активности и авидности цоликлонов, есть возможно применение по серии реагентов анти-A и анти-B.

На планшете нужно сделать надписи с названиям антигенов анти-A/анти-B. Далее снизу от соответствующих надписей капают примерно 0,1 миллилитр цоликлонов. У реагента анти-A цвет желтовато-розовый, у анти-B – синий.

Определение групп крови

Возле моноклональных антител капают по одной капле крови, смешивают ее уголком предметного стекла или стеклянной палочкой с реагентами. Перед дальнейшим смешиванием пар капель необходимо тщательно промыть и насухо вытереть стекло или палочку.

Наблюдение за процессом агглютинацией ведут в течение 2,5 минут, при этом тарелку или планшет нужно слегка покачивать. По истечении времени оценивают результат. Стоит отметить, что наблюдения за агглютинацией не требуют каких-либо специальных приспособлений.

Агглютинаты достаточно хорошо видны даже невооруженным глазом, быстро сливаясь и образуя большие хлопья. В случае, если не происходит склеивания, капля реагента приобретает равномерную окраску красного цвета.

Препараты цоликлонов

Выделяют эритротест-цоликлон анти-D.

Существуют три разновидности:

  • Обычный анти-D-цоликлон. При его добавлении развивается реакция непрямой агглютинации,
  • Супер. Вызывает прямую агглютинацию,
  • Препарат анти-D-микс, имеющий в составе компоненты обычного и супер цоликлона анти-D). С их помощью можно как выявить группу крови, так и определить резус-принадлежность крови.

Отличие других растворов состоит в названии, поскольку входящие в их состав антитела – иммуноглобулины М и G – предоставляют возможность только произвести типизацию крови по антигенам АВ0. Различие заключается исключительно в механизме слипания эритроцитов (агглютинация прямая/непрямая).

У каждого из этих препаратов есть свои собственные особенности использования и срок годности. Однако наибольшей популярностью в лабораторной клинической диагностике пользуются только 3 вышеуказанных препарата (анти-А, анти-В, анти-D).

Как определить группу в случае неверной трактовки результатов анализа

Иногда возможно получение недостоверных, ложных результатов. К примеру, если при добавлении к препарату крови изменился их цвет или если агглютинация наблюдается во всех ячейках планшетки.

Чтобы предотвратить такие результаты, если выполняется определение группы цоликлонами, алгоритм действий предусматривает определенные правила. Сначала следует посмотреть на срок обращения цоликлонов. Недопустимо использовать реагенты, у которых истек срок годности.

Обязательно нужно соблюдать и все условия правильного проведения процедуры. Помещение должно иметь хорошо оборудованное рабочее место с температурным режимом и достаточным освещением. Если инструкция к препарату содержит указания и касательно требуемой влажности, следует учитывать и данный фактор.

Немалое значение имеет и чистота планшетки, так как ее загрязнение может привести к возникновению ошибок в исследовании и, как следствие, к получению неверных результатов.

Где можно провести анализ?

Определение группы цоликлонами постепенно приобретает все большую популярность. Если раньше эта процедура проводилась исключительно в специализированных стационарах (к примеру, только в отделениях гематологии и хирургии), то сейчас процедура доступна почти в любой достаточно оборудованной лаборатории.

Методика цоликлонов находит применение и в поликлиниках. Там ее включают различные методы экспресс-определения группы крови, проводимые с целью скорейшего выставления пациенту диагноза.

На платной основе проведение этой услуги предлагают и многие центры косметологии и частной медицины. Бесплатно данная процедура, как было сказано выше, проводится по направлению терапевта или лечащего врача.

Если отсутствует возможность обратиться за анализом крови в поликлинику, исследование можно провести и самостоятельно при наличии набора препаратов и специальной планшетки. Однако необходимо помнить, что для получения достоверных результатов требуется соблюдать условия процедуры, в особенности это касается стерильности.

Загрузка…

Источник: https://KardioBit.ru/krov/chto-takoe-tsoliklony-kak-s-ih-pomoshhyu-opredelit-gruppu-krovi-i-rezus-faktor

Определение группы крови цоликлонами – что это и как проводится

Определение группы крови и резус фактора цоликлонами

Определение группы крови и резус-фактора играет основополагающую роль в случаях, когда речь идет о спасении жизни человека.

Именно по этой причине подобное исследование проводят всем пациентам в предоперационный период, беременным женщинам перед родами и во многих других ситуациях, которые могут потребовать срочного переливания.

Существует несколько способов определения группы крови с использованием разных лабораторных реагентов, и один из них основывается на применении химических веществ под названием цоликлоны. Что же представляет собой определение группы крови цоликлонами и как проводится процедура?

Определение группы крови цоликлонами

Для чего проводится анализ?

Группа и резус-фактор – генетически обусловленные характеристики крови, которые наследуются от родителей и остаются неизменными на протяжении всей жизни человека. Классификация групп крови осуществляется, исходя из определенного набора биохимических параметров и состава антигенов, и насчитывает 4 основных группы.

Переливание пациенту крови несовместимой группы или с другим резус-фактором несет с собой смертельную опасность – иммунная система начинает вырабатывать антитела против чужеродных клеток, которые атакуют и разрушают их.

Именно по этой причине в ситуациях, которые несут с собой риск обширной кровопотери, необходимо точное определение принадлежности крови и резус-фактора как у донора, так и у реципиента.

Таблица групп крови и резус-факторов

Как проводится исследование?

Для определения группы крови с использованием цоликлонов необходима плоская ровная поверхность (планшетка), смоченная водой, набор химических реагентов и пробы биологической жидкости, причем специалист может использовать любую кровь: капиллярную, венозную, замороженную и т. д.

  1. Стороны планшета помечают, чтобы не перепутать, на какую из них будет нанесен тот или иной тип цоликлонов.

    Процедура определения группы крови цоликлонами

  2. На поверхность капают по одной капле реагентов (обычно цилоклоны анти-А и анти-В) и крови, причем объем химических веществ должен в 8-10 раз превышать объем биоматериала.
  3. Подождать 3-5 минут, аккуратно покачивая планшет, чтобы жидкости хорошо смешались, а эритроциты не оседали по краям образцов.

Планшет для определения группы крови

Важно! Спустя несколько минут наступит реакция, по которой можно с высокой точностью определить принадлежность крови к определенной группе.

Интерпретация результатов

Интерпретация результатов процедуры проводится визуально – жидкости либо полностью соединяются, либо наступает склеивание (агглютинация) кровяных телец, вследствие чего биоматериал сворачивается и в нем образовываются мелкие хлопья.

Интерпретация результатов

Расшифровка осуществляется следующим образом:

  • если реакция отсутствует во всех образцах биоматериала, его можно причислить к I группе (это означает, что агглютиноген в клетках крови отсутствует);
  • вступление кровяных клеток в реакцию с цоликлоном анти-А свидетельствует о том, что кровь исследуемого человека относится к II группе;
  • склеивание эритроцитов с цоликлоном анти-В – признак III группы крови;
  • если биоматериал вступил в реакцию со всеми веществами, то он принадлежит к IV группе.

Исследуемая кровь группы О(I)

Для проверки точностии результатов и определения резус-фактора к образцам биоматериала добавляют цоликлон АВ – если произошла реакция агглютинации, он в крови определяется как положительный (отсутствие склеивания эритроцитов говорит об отрицательном резус-факторе).

Чтобы исключить заболевания, при которых агглютинация происходит при контакте с любыми раздражителями, капля крови пациента смешивается с физраствором.

В случаях, когда визуально определить результат невозможно, анализ переделывают, а образцы рассматривают под микроскопом.

Таблица. Реакции разных групп крови с цоликлоном анти-А и анти-В.

Группа кровиРеакция с цоликлоном анти-АРеакция с цоликлоном анти-В
I группаОтсутствуетОтсутствует
II группаПоложительнаяОтсутствует
III группаОтсутствуетПоложительная
IV группаПоложительнаяПоложительная

Цоликлон Анти-B флакон-капельница

Что следует учитывать при проведении анализа?

Чтобы результат анализа был максимально достоверным, при проведении процедуры необходимо соблюдать ряд условий:

  • реагенты должны храниться в холодном месте при температуре +2-8 градусов во флаконах с плотно закрученной крышкой (в случае нарушения правил хранения они быстро теряют свои свойства);
  • для проведения анализа нельзя использовать цоликлоны с истекшим сроком хранения (он составляет около 30 дней) или жидкости, которые содержат осадок, хлопья или мусор;
  • исследование выполняется в хорошо освещенном помещении при температуре воздуха не ниже +15 и не выше +25 градусов, причем в нем не должно быть грязи, пыли и других факторов, способных исказить результат;Температура воздуха во время процедуры должна соответствовать
  • при нанесении биоматериала и реагентов на поверхность планшетки следует точно соблюдать пропорции – если крови будет слишком много, реакцию сложнее отследить, а в противоположном случае (при малом объеме) она будет слишком медленной;
  • нельзя допускать, чтобы капли крови, смешанные с разными типами цоликлонов, сливались вместе – если это случилось, исследование проводят заново; по этой же причине для смешивания реагентов с биоматериалом следует использовать разные палочки.

Процесс определения группы крови

Продолжительность реакции должна составлять не менее 3 минут, а при сомнительном результате время наблюдения за образцами биоматериала следует продлить до 5 минут. Однако по истечении 10 минут может произойти подсыхание биоматериала и естественное выпадение эритроцитов в осадок, поэтому доверять такому исследованию не стоит.

Что может повлиять на результат?

Цоликлоны чувствительны к факторам окружающей среды, соответственно, при проведении исследования необходимо соблюдать температурный режим и правила гигиены – помещение должно быть чистым и сухим, а отдельные образцы крови не должны контактировать друг с другом.

Кроме того, при некоторых патологиях кровь человека способна менять свои характеристики, вследствие чего проведение исследования существенно усложняется.

Так, при дисфункции печени, селезенки, септических процессах и обширных ожогах у пациентов наблюдается так называемая панагглютинация крови – эритроциты выпадают в осадок даже при реакции с физраствором.

У больных лейкозом и новорожденных младенцев наблюдается иная картина – кровяные тельца не реагируют на раздражители, из-за чего отследить реакцию склеивания становится невозможно.

Что влияет на результаты процедуры

Обратите внимание! Кроме того, у близнецов, людей с пересаженным костным мозгом или у тех, кто перенес неоднократное переливание крови, в биологических жидкостях уживаются разные типы эритроцитов – соответственно, при проведении анализа наблюдаются непредсказуемые результаты. Для определения группы в вышеперечисленных случаях требуются дополнительные лабораторные анализы с использованием специального оборудования.

Анализ с использованием цоликлонов – один из наиболее простых и точных способов определения группы крови человека. При соблюдении всех правил и условий проведения процедуры вероятность ошибочного результата сводится к минимуму, поэтому химические реагенты данного типа применяются практически во всех современных лабораториях.

— Определения групп крови с помощью цоликлонов

Источник: https://med-explorer.ru/serdechno-sosudistaya-sistema/pervaya-medicinskaya-pomoshh/opredelenie-gruppy-krovi-coliklonami.html

Цоликлоны: что это, определение группы крови

Определение группы крови и резус фактора цоликлонами

   Цоликлоны, как бы ни звучало это непонятное название, представляют собой лишь моноклональные антитела, помещенные в солевой раствор. Названием отдали должное месту работы изобретателей растворов – цоли (Центральный Ордена Ленина Институт). Ныне это Гематологический научный центр.

Препараты, названные цоликлонами применяются в качестве реагентов для определения группы крови и ее резус-фактора. Поставляются цоликлоны в пластиковых флаконах по 10 мл. или же в стеклянных (5 мл) в жидком виде. Флаконы для удобства снабжены капельницами.

Метод определения группы крови цоликлонами прост и точен. По этой причине он используется как основной.

Что такое цоликлоны

Для определения группы крови и установления резус-фактора в лабораториях используется несколько методов, и анализ с применением цоликлонов используется чаще всего. Эти антитела моноклинального типа, разработанные инженерами-генетиками, имеют повышенную активность и обеспечивают ускоренную реакцию агглютинации.

Справочно. Агглютинация – склеивание и выпадение в осадок.

Принцип действия заключается в соединении с агглютиногенами – химическими компонентами, находящимися на верхнем слое определенных эритроцитов. В зависимости от реакции становится возможным определение группы крови цоликлонами. О наличии в составе агглютиногена А говорит реагент анти-А, соответственно, агглютиноген B выявляют с помощью вещества анти-B.

Отметим, что цоликлоны являются достаточно универсальным инструментом. Они позволяют определять группу крови как в системе AB0 (с использованием реагентов анти-А (красная жидкость) и анти-B (синяя жидкость)), так и в системе резус (с использованием реагента анти-D (прозрачная жидкость)).

Справочно. Для исследования используется нативная (живая) кровь в консерванте или без него, взятая из пальца.

Чтобы узнать ГК, используя цоликлоны, необходимо взять изделие с плоской поверхностью (планшет), сами реагенты и две капли крови.

Для анализа подходит практически любая жидкость независимо от состояния (законсервированная или без консерванта) и способа забора (из вены/пальца).

Перед нанесением на поверхности планшета делаются пометки, показывающие, где будет использоваться тот или иной цоликлон.

После подготовки поверхности лаборант наносит на нее по крупной капле реагента: обычно анти-А располагают слева, а анти-B – справа. Затем к веществу добавляют по кровяной капле, ее размер должен быть десятикратно меньше объема нанесенной жидкости.

Планшет требуется осторожно раскачивать из стороны в сторону, чтобы цоликлоны и кровь перемешались, но капли с разными реагентами не слились друг с другом. Спустя несколько минут можно наблюдать полное соединение жидкостей либо реакцию агглютинации, когда эритроциты склеиваются, а и наступает свертывание.

Как проводится диагностика и лечение сепсиса

Powered by Inline Related Posts

Результаты исследования расшифровывают следующим образом:

  • Отсутствие агглютинации в обоих случаях определяет первую группу.

  • Сворачивание при воздействии цоликлона анти-А говорит о том, что кровь относится ко второй группе.
  • Агглютинация в капле с реагентом анти-B – признак третьей группы.

  • Выпадение осадка в обоих каплях говорит о принадлежности к четвертой группе.

В случае появления последней реакции данные требуется проверить с помощью повторных анализов: кровяная капля смешивается с цоликлоном анти-AB, появление агглютинации подтвердит результат первого исследования. Вторая проверка исключает склеивание эритроцитов неспецифичного типа, которое может произойти при наличии ряда тяжелых болезней.

В рамках второго исследования кровь добавляют в раствор хлорида натрия: если жидкость относится к четвертой группе, положительной реакции на физраствор быть не должно, иначе речь идет о наличии заболевания, меняющего свойства кровяных телец.

Нюансы процедуры

Точность исследования ГК и резус-фактора с помощью цоликлонов очень высока, однако порой анализ выдает неправильные результаты: причиной является фактор человеческой ошибки, когда процедуру проводят с нарушениями.

Чтобы снизить риск такой ошибки, нужно помнить о следующих аспектах:

  • Цоликлоны хранятся в холодильнике, оптимальный температурный режим – +2… +8 градусов по Цельсию. Если флакон распечатан, его содержимое нужно использовать в течение 30 дней, крышка должна быть плотно завинчена. Реагенты очень чувствительны к внешним воздействиям и при несоблюдении правил хранения или по истечении срока теряют свои качества, что приводит к ошибкам.
     
  • Исследование проводится при ярком освещении, оптимальный режим в лаборатории – +15… +25 градусов по Цельсию. Если климатические условия не дают возможности соблюсти нужную температуру воздуха, поверхность планшета перед процедурой охлаждают.
     
  • Важно не спутать, какие цоликлоны где находятся на планшете, для этой цели их местоположение обозначается на поверхности маркером. Хотя реагенты анти-А и анти-B имеют цветовое различие, после добавления крови оно практически исчезает.
     
  • Следует соблюдать пропорции жидкостей: если эритроцитов будет слишком много, реакцию агглютинации будет сложнее отследить, в противоположном случае (слишком малый объем) склеивание происходит в замедлении.
     
  • Нельзя допустить, чтобы две капли соединились: даже касание краями приводит к искажению результатов анализа. Если жидкости все же слились, исследование с помощью цоликлонов проводят сначала.
     
  • При смешении при помощи лабораторной стеклянной палочки необходимо брать отдельный предмет для каждой изучаемой капли.
     
  • Минимальная продолжительность наблюдения – 3 минуты, при неоднозначных результатах исследование длится до 5 минут.

В ходе процедуры можно отметить и реакции, способные ввести в заблуждение: например, замедленное склеивание происходит при воздействии второго реагента. Когда реакция затягивается, со временем жидкость подсыхает, что сопровождается естественным выпадением эритроцитов в осадок, поэтому этот результат не считается достоверным.

Также в ряде случаев отмечается оседание кровяных телец по краям: неопытные специалисты принимают эффект за склеивание, но в действительности это случается, если планшет оставили в неподвижном состоянии, наблюдая за реакцией. Только если поверхность слегка раскачивали, результат можно считать правильным.

Также определить группу может быть сложно, если пациент страдает от одной из болезней, изменяющих свойства кровяных телец. К таким заболеваниям относят проблемы печени, селезенки, пневмонию, ожоги различной степени, сепсис. Наличие таких болезней сильно обостряет способность эритроцитов выпадать в осадок, и панагглютинация наблюдается даже при воздействии физраствора.

Справочно. Панагглютинация представляет собой искажение процесса склеивания (агглютинации). Изменение белкового состава сыворотки крови может привести к склеиванию всех со всеми.

С другой стороны, цоликлоны не вызовут агглютинацию, если пациент страдает лейкозом: при этой болезни кровяные тельца не реагируют даже на высокоактивные раздражители, такое же явление характерно для младенцев.

Важно. У близнецов и людей, перенесших операцию по пересадке костного мозга или частые переливания жидкости иной группы, может появиться кровяная химера, при которой в кровеносной системе уживаются эритроциты различных типов.

В этом случае анализ особенно труден, для максимально точного определения химического состава требуется провести дополнительные лабораторные исследования с использованием специального оборудования и других способов.

Источник: https://serdcet.ru/coliklony.html

Поделиться:
Нет комментариев

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.