Методика определения резус фактора

Содержание

Способы определения резус-фактора

Методика определения резус фактора

Всеметоды определения резус-фактора делятсяна способы, применяемые в клинике: вусловиях приемного покоя, в операционной,на отделении у постели больного и т. д.,не требующие специального лабораторногооснащения, и лабораторные способы.

Способыопределения резус-фактора в клинике.Используютсядва так называемых экспресс-метода:экспресс-метод со стандартным универсальнымреагентом в пробирке без подогрева.Экспресс-метод на плоскости без подогрева.

Экспресс-метод определения Rh-фактора стандартным универсальным реагентом в пробирке без подогрева

Дляисследования может быть использованасвежая несвернувшаяся кровь, взятая изпальца (из вены) непосредственно передисследованием, или консервированнаякровь без предварительной обработки,а также эритроциты из пробирки послеформирования сгустка и отстаиваниясыворотки.

Методикапроведения реакции

Исследованиепроводят в центрифужных пробиркахобъемом не менее 10 мл. На дно пробиркивносят одну каплю стандартногоуниверсального реагента, представляющегособой антирезусную сыворотку группыАВ (IV),содержащую 33% раствор полиглюкина.

Затемв нее добавляют однукаплю исследуемойкрови (или эритроцитов). Круговымвращением пробирки содержимое размазываютно ее внутренней поверхности такимобразом, чтобы содержимое растеклосьпо стенкам. Это значительно ускоряетагглютинацию и делает ее крупнолепестковой.

Агглютинация на стенках пробиркинаступает, как правило, в течение первойминуты, но для образования устойчивогокомплекса «антиген- антитело»и четкойагглютинации наблюдать следует не менее3 минут.

Затем для исключения неспецифическойагрегации эритроцитов в пробиркудобавляют 2-3мл физиологическогораствора и перемешивают путемодно-двукратного перевертывании пробирки(без взбалтывания!).

Наличиеагглютинации (крупные хлопья на фонепросветленной жидкости) указывает нарезус-положительную принадлежностьисследуемой крови. Отсутствие агглютинации(в пробирке гомогенно окрашенная розоваяжидкость) свидетельствует орезус-отрицательной принадлежности.

Лабораторные методы определения резус-фактора

Дляопределения резус-принадлежности кровибольного в условиях лаборатории применяютчетыре основных метода.

  1. Метод агглютинации в солевой среде

Используютспециальные сыворотки, содержащиеполные антитела анти-резус. Эритроцитыв виде 2% взвеси в изотоническом растворехлорида натрия соединяют в пробиркахс антирезусной сывороткой.

Пробиркипомещают на 1 час в термостат притемпературе 37°С, после чего осадокэритроцитов на дне пробирки рассматриваютс помощью лупы и по его форме учитываютрезультат. При положительном результате(Rh+)осадок имеет характерный рисунок в виденитей или зернистости.

При отрицательном(Rh-)осадок размещается равномерным слоеми имеет вид правильно очерченного круга.

  1. Метод конглютинации с желатином

Впробирку помещают равные объемыисследуемых эритроцитов, антирезуснойсыворотки и 10% раствора желатина. Пробиркиинкубируют при температуре 45-48єC,после чегодобавляют десятикратный объемфизиологического раствора. Пробирки2-3 раза переворачивают и учитываютрезультат по наличию агглютинации,видимой невооруженным глазом.

  1. Непрямой антиглобулиновый тест (реакция Кумбса)

Этареакция является наиболее чувствительнойдля выявления неполных антител кауто- иизоантигенам эритроцитов. К ней, какправило, прибегают при возникновениитрудностей в определении резус-принадлежностикрови, связанных с нечеткими результатами,полученными при других методахисследования.

Реакция основана наиспользовании антиглобулиновой сыворотки(АГС).

При обработке резус-положительныхэритроцитов неполными антителамианти-Rhнаступает их обволакивание (сенсибилизация)по отношению к АГС, которая и агглютинируетсенсибилизированные эритроциты,поскольку имеет антитела к глобулинам.

Впробирку вносят антирезусную сывороткуи отмытые физиологическим растворомэритроциты; помещают на 1 час в термостатпри температуре 37°С, после чего эритроцитытщательно отмывают. Последующий этапреакции проводят на плоскости.

Каплювзвеси эритроцитов смешивают с равнымколичеством антиглобулиновой сывороткии учитывают результат. Наличие агглютинацииявляется показателем того, что исследуемыйобразец крови резус- положительный.

Если агглютинация отсутствует, испытуемаякровь – резус-отрицательная.

  1. Реакция с aнти-D-моноклональными антителами.

Напланшете смешивают большую каплю (0,1мл) анти-D-моноклональныхантител (МКА) и маленькую каплю (0,01мл)исследуемой крови. За реакцией наблюдаютв течение 2,5 мин. При смешивании анти-D-МКАобразцами резус-положительных эритроцитовотмечается быстрое наступающаялепестковая агглютинация. Если кровьрезус-отрицательная – агглютинацияотсутствует.

Источник: https://StudFiles.net/preview/5801918/page:25/

Как определить резус-фактор крови и что такое резус-конфликт?

Методика определения резус фактора

При выполнении множества медицинских действий медикам необходимо знать резус-фактор человеческой крови, который передается генетическим путем. Чтобы избежать резус-конфликта, информация о таком свойстве нужна и при ведении беременных. Для установления этого свойства используется несколько методов диагностики.

Резус-фактор — что это такое?

Резус-фактор – это антиген, который находиться на поверхности красных кровяных телец (эритроцитов)

Один из основных параметров, который определяется в крови, — резус-фактор. Такая характеристика передается от родителей и не способна меняться в течении жизни.

Резус-фактором называется белок, который находится на верхней части эритроцитов. Его наличие, а также отсутствие считается индивидуальным явлением. Резус-фактор, при котором присутствует антиген D, является положительным. В расшифровке анализа он обозначается так: Rh+. Резус, который не имеет антигена, в расшифровке обозначают Rh-.

За статистикой 85% людей имеют положительный резус, а остальные – отрицательный.

Определяется такой параметр во время установления группы крови. Информация о резус-факторе пациента необходима медицинским работникам в следующих случаях:

  • подготовка к операции
  • в период беременности
  • для переливания крови
  • пересадка органов
  • гемолиз
  • анемия
  • сепсис

Для определения этой характеристики крови применяется несколько диагностических способов.

Виды методов исследования, проведение процедуры

Резус-фактор может быть положительным либо отрицательным

Анализ на установления резус-фактора проводят в лабораторных или стационарных условиях больницы. Для этого сдают венозную кровь или кровь из пальца.

Узнать резус-фактор можно с помощью следующих методов:

  • Цоликлоновый способ. Для этого способа используют специальные моноклональные реагенты. Их помещают на специальный планшет, возле него наносят кровь. После перемешивания в трехминутный период планшет переворачивают из стороны в сторону. При появлении осадков или хлопьев расшифровывается положительный результат. Отрицательный резус будет, когда изменения отсутствуют.
  • Экспресс-метод. Такой метод применяется чаще всего. Исследование выполняют в пробирках, используя сыворотку АВО, которая является для всех групп универсальной. В каплю такого материала прибавляют столько же эритроцитов, после чего покачивают пробирку три минуты. Раствор хлорида натрия вливают в этот состав, несколько раз пробирку следует перевернуть и с помощью отраженного света определяют агглютинацию.
  • Способ конглютинации на чашках Петри. Помещают в чашку Петри несколько капель сыворотки антирезусной по левую и правую сторону разносерийные. В этот материал добавляют контрольные резус-отрицательные и резус-положительные, а также исследуемые эритроциты. После того, как перемешали, чашку располагают на водяной бане на протяжении десяти минут. Затем при свете внимательно рассматривают. Если агглютинация присутствует, то этот факт свидетельствует о положительном резусе, если отсутствует – результат отрицательный.
  • С использованием желатина. Этот метод заключается в добавлении в кровь желатинового раствора, в его подогревании в течении десяти минут, добавления хлорида натрия (изотонический раствор). После этих действий содержимое в пробирке перемешивают.

Читайте:  Как и для чего проводится анализ крови на сахар с нагрузкой?

Совместимость групп крови

Резус-фактор крови определяется при исследовании одновременно с установлением ее группы. При каждой группе крови возможно наличие или отсутствие антигена.

В медицине существует такое понятие, как совместимость группы. При этом устанавливается возможность зачатия, ведь в этом случае также возможен конфликт.

Специалисты определяют следующие варианты совместимости при зачатии:

  • Первая группа у мужского пола совмещается со всеми группами женского пола.
  • Совместимы четвертая, а также вторая группа у женщин со второй у мужчины.
  • Конфликт возможен при второй группе у отца, но первой и третий у матери.
  • Конфликтными являются первая и вторая у женского пола, и третья у мужчины.
  • Совместимыми считаются третья группа крови у мужчины и третья, а также четвертая у женщины.
  • Если у обоих супругов четвертая группа – совместимость.
  • При четвертой группе у мужского пола и всех остальных групп у женщин наблюдается конфликт.

Подробнее о группах крови и резус-факторе можно узнать из видео:

По группе крови конфликт заключается в том, что иммунитет женщины вырабатывает специфические антитела, которые убивают сперматозоиды. В этом случае, даже если оба супруги полностью здоровы, возможна проблема с оплодотворением.

Специалисты также утверждают, что наиболее опасным считается несовместимость групп матери и плода при первой отрицательной группе у беременной и третьей или второй положительной у плода.

Почему возникает резус-конфликт

Резус-конфликт – это опасное осложнение, когда материнский организм относится к плоду, как к угрозе

Резус-фактор – параметр крови, передаваемый по наследству. Если у обоих родителей он отрицательный, то обычно наследуется также отрицательный. При положительных резусах у супругов – у ребенка будет только такой резус, как и у родителей. При разных резусах у женщины и мужчины у малыша может быть, как положительный, так и отрицательный результат.

Существует такое явление, как резус-конфликт. Такое явление имеет место при беременности, когда не совмещаются резусы у ребенка и будущей мамы. Если у беременной резус отрицательный, а положительный у плода, то специалисты для предотвращения резус-конфликта предпринимают меры.

Положительный резус малыша наследуется от отца и если у беременной резус положительный, то материнский организм может начать отторжение плода.

Антитела женской крови могут вести активное нападение на красные клетки крови плода.

Такое явление может провоцировать самые опасные осложнения. Это может быть, как обычная анемия у родившегося ребенка, так и замирание плода или выкидыш.

Источник: http://DiagnozLab.com/analysis/biochemical/kak-opredelit-rezus-faktor-krovi.html

Методы определения резус-фактора

Методика определения резус фактора

Помимо группы крови, существует и еще один важный параметр– это резус-фактор. Эти данные должен знать каждый человек, на случай экстренных ситуаций, когда может понадобиться срочное переливание крови.

У военных, например, группа крови и резус-фактор нашиваются прямо на форму, чтобы в случае необходимости сразу же приступить к переливанию или операции, а не ждать результатов анализов.

Определение группы крови и резус фактора возможно в ходе обыкновенного анализа в поликлинике.

Как узнать свой резус-фактор?

Как известно, кровь состоит из плазмы и особых клеток: эритроциты, тромбоциты и лейкоциты. Именно свойства эритроцитов определяют индивидуальную группу крови у человека (их 4), а также резус-фактор (2 группы). Резус-фактор может быть положительным и отрицательным.

Он определяется наличием на эритроците специального белка (антигена). 85% людей имеют этот белок, поэтому они имеют положительный резус, а у остальных 15% резус отрицательный. Как правило, все задаются вопросом, как определить резус фактор.

Резус-фактор обозначается как Rh и выявляется в ходе лабораторных исследований.

Определить резус принадлежность крови можно такими методами:

  • Методом конглютинации (чашки Петри).
  • С помощью цоликлонов.
  • Экспресс-метод.

Суть методов заключается в обнаружении антигена (белка) на поверхности эритроцита. Для первого анализа необходимы специальная лабораторная посуда, которая называется чашки Петри. Это 2 небольшие стеклянные чашки, которые внешне напоминают пластиковые крышки для банок.

Алгоритм проведения анализа таков:

  1. Антирезусная сыворотка (реагент) наносится по 2 капли рядом друг с другом в 3 ряда (всего 6 капель).
  2. К каждой серии добавляется по 1 капле крови.
  3. Содержимое чашек перемешивается и ставится на водяную баню при температуре 46-48 С.
  4. Если в ходе проведенного теста клетки эритроцитов склеились (образовались хлопья), то Rh – положительный. Если же склеивания не наблюдается, то Rh – отрицательный.

Следующий метод определения резуса проводится с помощью моноклональных реагентов – цилоклонов. Для этого капля реагента (0.1 мл) наносится на планшет. Возле реагента также наносится и капля крови (0.01 мл).

Затем эти две жидкости тщательно перемешивают. В течение 3 минут каждые полминуты планшет нужно поворачивать со стороны в сторону. Если спустя эти 3 минуты образовались хлопья или осадок, то резус-фактор является положительным.

При отсутствии каких-либо изменений резус-фактор отрицательный.

Rh также можно определить методом экспресс-анализа, когда результат можно получить практически сразу. Для этого капля крови смешивается с реагентом.

Затем пробирку поворачивают таким образом, чтобы ее содержимое равномерно распределилось по стеклу. После этого можно считывать результат анализа.

При положительном резус-факторе наблюдается образование хлопьев, при отрицательном —  изменений не происходит.

Резус-конфликт и подготовка к анализам

Определение резус фактора необходимо при планировании беременности. Резус-фактор – это явление, которое закладывается на генетическом уровне в утробе матери.  Если Rh плода будет противоположным резусу матери, то может возникнуть резус-конфликт.

В норме кровеносные системы матери и ребенка никак не соприкасаются друг с другом, но в некоторых случаях Rh ребенка проникает в кровь матери, провоцируя реакцию ее организма, при котором плод воспринимается как чужеродное тело. Это может быть значительной угрозой для здоровья и жизни ребенка.

Чтобы избежать подобных ситуаций, обоим партнерам необходимо сдать кровь на группу и Rh. Если резус-фактор является одинаковым у обоих партнеров (положительный или отрицательный), то конфликта крови не возникнет.

Многих интересует вопрос, откуда берут кровь для определения резус-фактора и группы крови. Обычно кровь берут из пальца. Перед тем, как проводить анализ крови на резус фактор, необходимо ознакомиться с некоторыми правилами.

Как правило, кровь на анализ берут утром, т.к. в течение дня показатели крови могут меняться. Также необходимо помнить, что сдавать анализы нужно строго натощак.

Последний прием пищи должен быть не ранее, чем за 8 часов до анализа.

То, что сдавать анализ нужно натощак, обусловлено тем, что с едой меняется и состав крови (например, может повыситься сахар). Чтобы анализ был «чистым», воздержитесь от употребления пищи и сдавайте анализы натощак.

Исключением из этого правила могут стать люди, которые по состоянию здоровья вынуждены есть часто маленькими порциями.

Отсутствие пищи в установленное время и сдача анализов натощак может спровоцировать нарушение в организме, поэтому необходимо обратиться к лечащему врачу за индивидуальной консультацией.

За 48 часов до сдачи анализа также необходимо отказаться от алкоголя, от жирной и соленой пищи. Лучше всего в эти дни придерживаться правильного питания и не переедать.

Натощак можно пить воду, т.к. вода не влияет на состав крови и, как следствие, никак не скажется на результате анализа. Помните, что это должна быть обыкновенная чистая вода.

Газированные напитки, соки и чаи употреблять не рекомендуется. Необходимо прекратить прием лекарственных средств, или же предупредите о них врача, который назначил вам анализ.

Также перед тем, как  сдать анализы, не рекомендованы физические нагрузки или эмоциональные перенапряжения.

Источник: http://okrovi.ru/gruppy-krovi/metody-opredeleniya-rezus-faktora.html

Как определить резус фактор крови

Методика определения резус фактора
: 770

Резус-фактор крови человека показывает наличие или отсутствие на поверхности эритроцитов специфического протеина Rh.

Если Rh присутствует, то кровь называют резус-позитивной Rh+, если отсутствует, то Rh-. Белковая молекула Rh присутствует на мембране эритроцитов 85% землян.

Определение резус фактора крови проводят для предотвращения возможной несовместимости при процедуре переливания крови.

Влияние резус-фактора на состояние здоровья людей не установлено. Признак передаётся по наследству и не меняется всю жизнь.

Когда необходим анализ

Информация о присутствии или отсутствии Rh factor необходима, если предстоит гемотрансфузия или хирургическая операция, или женщина забеременела. Анализ выявления резус-фактора проводится во время определения группы крови.

Если происходит трансфузия резус-позитивной донорской крови резус-негативному реципиенту, возникает резус-столкновение.

Иммунная система организма реципиента начинает продуцировать антитела к резус-положительным эритроцитам, они разрушаются. Такое явление получило название «гемолиз».

Поэтому, при гемотрансфузии необходимо, чтобы кровь отдающего и принимающего совпадала по группе и по резусу.

Особую опасность представляет резус-конфликт крови во время беременности резус-негативных матерей. Если у резус–негативной матери формируется резус-позитивный плод, иммунная система вырабатывает антитела в крови к эритроцитам эмбриона и разрушает их.

Плод, в таком случае, погибает. Риск такого развития событий наиболее вероятен при второй и последующих беременностях. Разработаны методы предохранения от резус-конфликта Rh- матери и Rh+плода, позволяющие сохранить жизнь и здоровье будущего ребёнка.

При беременности очень важно знать резус фактор крови

Определение Rh крови происходит во время забора крови из пальца или вены для стандартного анализа крови.

Методы определения

Сущность всех методов определения резус-фактора заключается в прохождении реакции склеивания (агглютинации) эритроцитов.

Различают четыре метода определения резус-фактора:

Метод конглютинации

Для проведения анализа конглютинативным методом используют сосуды Петри, пипетки одноразовые, физраствор, стандартные serum ко всем группам крови.

Проведение анализа заключается в следующих действиях лаборанта:

  • Наносят на поверхность чашки Петри три ряда(серии) капель реагента, по две в каждом;
  • В каждую серию добавляют каплю испытуемой крови и по капельке контрольных позитивных и контрольных негативных эритроцитов;
  • Смешивают и выдерживают на водяной бане при 47°C десять минут;
  • Определяют результат. Позитивным считают выпадение хлопьев, а негативным их отсутствие.

Метод цоликлонов

Фактор резус обнаруживают при помощи моноклональных антител. Это иммуноглобулины в крови, которые продуцируются клетками, произошедшими от одной предшественницы, то есть моноклоном. Реагенты, выделенные из таких клеток, получили название цоликлоны.

Ампулы с цоликлонами

Определение резус-фактора крови цоликлонами проводят в натуральной крови. Используют метод прямого скучивания на планшете. В лунку пластины вносят одну крупную каплю цоликлона, рядом помещают каплю крови небольшого размера.

Кровь смешивают с реагентом при покачивании планшета. Первые признаки склеивания эритроцитов появляются, спустя 15 секунд, но результат определяют через три минуты. Позитивным для резуса считают появление крупиц свернувшейся крови.

Все исследования проводят в лаборатории при температуре 15-25°С и хорошей освещённости.

Ускоренный метод

Используют универсальную serum антирезус. Определение резус фактора крови методика ускоренная включает:

  • Внесение в пробирку капли крови и двух капель препарата «антирезус»;
  • Перемешивают содержимое пробирки поворачиванием без встряхивания. Содержимое равномерно распространяется по стенке пробирки;
  • Добавление в пробирку физраствора в количестве около 3 мл и перемешивание содержимого при неоднократном переворачивании посуды;
  • Наблюдение хлопьеобразования. Там, где они формируются, кровь Rh+.
  • Этот метод быстрый, но не точный. Псевдопозитивная реакция с Rh- эритроцитами проявляется в случае нахождения на поверхности эритроцитов антигенов в крови, отношения к Rh не имеющих. Параллельно проводят ещё один тест с контрольной эссенцией усилителя. Если и в этом случае образуются хлопья, результат признают недостоверным и тестирование крови повторяют с новым реагентом.

Желатиновый метод

Широко используют желатиновый ускоренный метод определения Rh. Он состоит в добавке к крови одной капли 10 % эссенции желатина, десятиминутной выдержки пробирок в термостате при +37, с последующим добавлением подогретого изотонического р-ра NaCl. Желатин препятствует образованию неспецифической агглютинации.

Резус фактор родителей

Комбинация хромосом, влияет и на пол будущего ребёнка и на его резус-фактор. Существует вероятность определения группы крови по родителям. Если мать и отец лишены резусного антигена, то и их дети, будут иметь Rh-. Резус-позитивные гены обладают доминантностью, то есть, преимуществом пред резус- негативными.

Если у одного родителя Rh+, а у другого Rh-, шанс на получение ребёнком Rh+ составляет 75%, а на рождение с Rh- , соответственно, 25%. Если у обоих родителей Rh+, то в пятнадцати случаях из шестнадцати, у их чад тоже будут Rh+. И, только в одном случае из шестнадцати, существует вероятность появления на свет младенца с Rh-.

Сведения о резус-факторе необходимы, если есть показания для переливания крови. Гемотрансфузия возможна только при использовании совместимой по резусу, и группе. Определение Rh-factor у беременных является залогом предупреждения рисков для формирующегося плода. Лучше всего знать свой Rh на этапе планирования беременности, чтобы исключить резус-столкновение между Rh-матерью и Rh+плодом.

Источник: https://SostavKrovi.ru/analizy/obshchiy/kak-opredelit-rezus-faktor-krovi.html

Определение резус-фактора крови: как узнать его экспресс-методом

Методика определения резус фактора

Как узнать резус-фактор крови?

Резус-фактор – один из параметров крови, который отражает присутствие или отсутствие на мембранах красных клеток особого белка Rh. В случае, если он есть, кровь резус-положительная и обозначается Rh+, при его отсутствии резус-отрицательной – Rh-.

Этот белок есть на эритроцитах большинства живущих на планете, но примерно у 15 % его нет. Его отсутствие или присутствие никак не сказывается на здоровье. Rh передается от родителей и на протяжении всей жизни остается неизменным.

Когда сдают анализ на Rh

Определение резус-фактора происходит во время анализа крови на группу. Эта информация необходима при переливании, при подготовке к хирургическому вмешательству и в период вынашивания плода.

Во время беременности может произойти конфликт между кровью будущей матери и кровью ребенка. Зная о том, что женщина резус-отрицательная, врачи могут заранее предпринять меры, чтобы избежать конфликта и сохранить здоровье резус-положительного плода.

Сдать кровь на резус можно в лаборатории любой поликлиники или в стационаре. Для исследования делают забор из пальца или из вены.

Как определяют

Методов определения Rh несколько:

  • На чашках Петри методом конглютинации.
  • С помощью цоликлонов.
  • Экспресс-методом в пробирках без подогрева.
  • Желатиновым методом.

Суть анализа заключается в выявлении антигена D с помощью антирезусных сывороток или моноклональных реагентов (цоликлонов) в реакции агглютинации (склеивания эритроцитов и образования хлопьев) в пробирках или на плоскости.

На чашках Петри

Для определения резус-фактора понадобятся чашки Петри, индивидуальные пипетки, раствор натрия хлорида изотонический, сыворотки стандартные для всех групп крови. Порядок проведения:

  1. Капают рядом по две капли реагента двух серий для трех исследований (в три ряда).
  2. В каждую из серий добавляют по капле исследуемой крови и эритроцитов (контрольных положительных и контрольных отрицательных).
  3. Перемешивают, на десять минут ставят чашку на водяную баню (47°C).
  4. Результат определяют по наличию или отсутствию хлопьев (слипшихся эритроцитов). Если красные клетки склеились, Rh положительный, если слипания не произошло, Rh отрицательный.

Определение Rh-принадлежности цоликлонами

Чтобы узнать резус-фактор, применяют моноклональные реагенты – цоликлоны, которые получают методом генной инженерии из асцитной жидкости мышей. Rh определяется во время реакции агглютинации, которая происходит на плоскости.

Процедура должна проводиться в помещении с хорошим освещением. Для теста берут цельную кровь, эритроциты, находящиеся в сыворотке, плазме, физрастворе или консерванте, или отмытые эритроциты. Для получения лучшего результата нужны эритроциты высокой концентрации, а пластинка, на которой будет происходить реакция, подогревается до 37°C.

  1. На планшет индивидуальной пипеткой капают большую каплю реагента (примерное количество – 0,1 мл).
  2. Около реагента капают исследуемую кровь (маленькую каплю) или эритроциты в количестве 0,01 мл.
  3. С помощью стеклянной палочки как следует смешивают реагент и кровь и каждые 30 секунд тарелку покачивают в течение трех минут, наблюдая за реакцией визуально.
  4. Реакция агглютинации начинается через 15 секунд, явно выраженной становится через 1 минуту, но результат учитывают только спустя три минуты.

Если началась реакция агглютинации (склеивание эритроцитов и выпадение их в осадок), кровь маркируют резус-положительной, если слипания красных клеток не наблюдается, резус-фактор отрицательный. Склеенные эритроциты, которые представляют собой хлопья, видны невооруженным глазом.

Результат трактуется в зависимости от того, произошла ли агглютинация красных клеток

Экспресс-метод

В качестве реагента применяется сыворотка под названием «антирезус», которая является универсальной для всех групп крови.

  1. В пробирку помещают каплю крови (эритроцитов) в количестве 0,05 мл, затем добавляют 2 капли реагента «антирезус».
  2. Пробирку поворачивают, не встряхивая, чтобы содержимое перемешалось и равномерно растеклось по стеклу.
  3. Примерно через три-пять минут происходит склеивание эритроцитов.
  4. Чтобы исключить агрегацию красных клеток, в пробирку добавляют раствор изотонический NaCl в количестве 2-3 мл и несколько раз переворачивают пробирку, чтобы содержимое перемешалось.
  5. После этого считывают результат. Если появились хлопья на фоне более светлой жидкости, Rh положительный, если хлопьев нет, жидкость окрашена равномерно в розовый цвет, Rh – отрицательный.

Нужно сказать, что универсальные сыворотки могут дать ложноположительную реакцию с Rh-отрицательными эритроцитами.

Может произойти неспецифичное склеивание красных клеток, на поверхности которых есть другие антитела – не атирезус. Поэтому параллельно проводят тестирование с контрольным раствором усилителя.

Если после введения контрольного раствора происходит агглютинация, результат считается недостоверным, и тестирование повторяют с другим реагентом.

С применением желатина

Эта методика основана на применении желатина (в виде раствора 10 %). Для тестирования используются и стандартные антирезусные реагенты, и цоликлоны.

  1. В пробирку капают одну каплю крови (0,05 мл) или эритроцитов в виде взвеси в сыворотке (50 %).
  2. Затем 2 капли подогретого заранее до жидкого состояния раствора желатина.
  3. Далее 2 капли реагента, затем смешивают.
  4. Пробирку ставят на пять-десять минут на водяную баню (47°C) или на полчаса в сухой термостат с такой же температурой.
  5. Затем в пробирку добавляют физиологический раствор (5-8 мл), закрывают крышкой и осторожно поворачивают два-три раза, чтобы перемешать.
  6. Для определения наличия хлопьев содержимое пробирки осматривают невооруженным глазом на свет или через увеличительное стекло.

При использовании желатина не происходит неспецифической агглютинации. После проведения такой пробы необходимы контрольные тесты:

  • со стандартными Rh+ эритроцитами;
  • со стандартными Rh- эритроцитами;
  • с исследуемой кровью (эритроцитами) и желатином.

Заключение

Информация о резус-факторе необходима в случае переливания крови. Для гемотрансфузии может быть использована только совместимая по группе и по резусу кровь. Кроме этого, следует определить резус-фактор во время беременности. Еще лучше узнать его на этапе ее планирования. Это необходимо, чтобы предотвратить резус-конфликт между Rh-положительным плодом и Rh-отрицательной женщиной.

Рекомендуем к прочтению: http://serdec.ru

Источник: http://mymylife.ru/zdorove/narodnaya-meditsina/10810-opredelenie-rezus-faktora-krovi-kak-uznat-ego-ekspress-metodom

Как узнать резус-фактор крови?

Методика определения резус фактора

Резус-фактор – один из параметров крови, который отражает присутствие или отсутствие на мембранах красных клеток особого белка Rh. В случае, если он есть, кровь резус-положительная и обозначается Rh+, при его отсутствии резус-отрицательной – Rh-.

Этот белок есть на эритроцитах большинства живущих на планете, но примерно у 15 % его нет. Его отсутствие или присутствие никак не сказывается на здоровье. Rh передается от родителей и на протяжении всей жизни остается неизменным.

Методики определения групп крови, описание таблицы

Методика определения резус фактора

Практически каждый человек хотя бы единожды за свою жизнь проходил тест для установления принадлежности группы крови. О методах проведения данного анализа и об их достоверности пойдет речь далее.

Для чего проводится диагностика?

Группа крови – это определенный ряд антигенов, размещенных на поверхности эритроцитов, которые и определяют их специфичность. Таких антигенов известно очень много, поэтому принято единую классификацию крови по АВО и резус-фактору.

Этот показатель в обязательном порядке определяется у пациентов перед хирургической операцией, военным, полицейским и другим категориям людей, которые могут потребовать срочного переливания крови.

Стандартная методика определения группы крови

Самый распространенный метод исследования данного показателя – это способ с применением стандартной сыворотки. Эта диагностика определяет общепринятые антигены по системе АВО.

Изогеммагглютинирующая сыворотка представляет собой совокупность специальных антител к наружным частичкам эритроцитов.

Если находится совместимый антиген, на который могут воздействовать антитела, то формируется комплекс, способствующий началу иммунно-защитного механизма.

Вследствие этого происходит склеивание эритроцитарных клеток крови (агглютинация). Если подобное происходит, то делается вывод о несовместимости крови.

Данные сыворотки изготавливаются из крови доноров по специальной системе, подразумевающая под собой извлечение плазмы, в которой и содержать антитела, после чего ее разводят изотоником – хлорид натрия, это проходит в несколько этапов:

  • В емкость наливают 1 мл воды, в которой растворено 0,9% обычной соли.
  • В эту же пробирку вносят такое же количество разведенной плазмы.
  • Затем 1 мл данной жидкости вносят в емкость с изотоником.

Процесс позволяет получить соотношение 1:256. Если методика разведения будет нарушена, то есть большая вероятность получения ошибочных результатов.

Проведение исследования

На поверхность планшета наносится 0,1 мл каждой сыворотки в район, где нанесена нужная пометка. За тем берется исследуемая кровь объемом 0,01 мл для каждого образца. И затем проводится смешивание каждой капли сыворотки с кровью.

Спустя пять минут проводят диагностику. Тестирование считается положительным, если прошла реакция агглютинации. Исходя из результатов анализов, выполняется построение таблицы, в которую они и заносятся.

Таблица результатов теста на группу крови с применением стандартных сывороток.

Методика перекрестных реакций

В этом случае, чтобы определить агглютиноген используют цоликлоны. Иначе стандартные сыворотки с технологией параллельного выяснения благодаря эталонным эритроцитарным клеткам.

Два этих способа весьма сходны между собой. Но различия все, же есть.

На поверхность, на которую предварительно помещаются различные сыворотки, наносят по небольшой капле обычных эритроцитов. Затем кровь разделяют на фракции при помощи центрифуги. И форменные элементы добавляют к стандартным сывороткам, а плазменную часть – к стандартным эритроцитарным клеткам. Оценивание результатов проводят через пять минут и показатели отмечают в таблице.

Благодаря данной методике исключаются ошибки при исследовании.

Метод с использованием цоликлонов

Если нет возможности определить группу крови стандартными сыворотками, то используют данную методику.

Цоликлоны – гибридные антитела, которые получают из в-лимфоцитов крови мышей.

Последовательность проведения диагностики такая:

  1. После нанесения отметок на планшет, которые соответствуют виду цоликлона, наносится раствор.
  2. К каждому образцу цоликлона вносят одну каплю диагностированной крови.
  3. Оценка результатов через пять минут.
  4. Для данной методики необходимо соблюдать специальные условия. Они включают в себя пригодность цоликлонов, температуру в помещении и уровень влажности.

Результаты анализов считаются позитивными в том случае, когда при смешивании данных фракций наблюдается реакция агглютинации. Если подобное произошло в двух образцах, то считается, что кровь относится к четвертой группе. Если реакция не наблюдается вовсе, то к первой. Диагностические ошибки в данной методике встречаются не часто.

Быстрый способ «Эритротест»

Выше перечисленные способы используются в медицине уже долгое время и распространены по всему миру. Но ввиду того, что отрасль постоянно развивается, вводятся быстрые диагностические методы по установлению принадлежности к группе крови. Таким нововведением считается и «Эритротест».

Чтобы определить показатель данным способом необходимо иметь следующее оборудование:

  • Стандартный планшет с пятью лунками
  • Скарификатор для прокола и получения биологической жидкости
  • Стеклянная пипетка с резиновой грушей
  • Пипетка для забора реактивов
  • Палочки для смешивания компонентов

Основное преимущество эритротеста состоит в том, что исследование не требует дополнительных условий и доступно в тот момент, когда проведение стандартной диагностики невозможно.

Последовательность проведения

В углублениях планшета размещают цоликлоны к антигенам поверхностного типа и основному, который отвечает за наследственную передачу резус-фактора.

В последнюю лунку добавляют контрольную сыворотку, которая исключит ошибочный результат и верно укажет на принадлежность к той или иной группе.

Оценивание результатов анализа проводится с помощью таблицы, в ней указываются возможные результаты тестирования.

Классификация по системе АВО

Группа крови, определение ее проводится исходя из специально разработанных норм. Существует определенная таблица, которая характеризует каждую группу крови.

ГруппыОписание
I (0)Эритроцитарные антигенные качества не наблюдаются
II (А)Присутствие антигена А
III (В)Наличие на поверхности эритроцитарных клеток антигена В
IV (АВ)Присутствие обоих антигенов

: Методы определения групп крови:

Источник: https://sosudask.ru/gruppa-krovi-opredelenie/

Поделиться:
Нет комментариев

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.